弧菌顯色培養基配方的選定和制備方法

　　

　　弧菌顯色培養基用法

　　

　　稱(chēng)取本品18.46g加入200ml蒸餾水，加熱煮沸溶解并不停攪拌，加熱10-20分鐘。冷卻至45-50℃時(shí)，傾入無(wú)菌平皿。

　　

　　注意：制備好的培養基一定要保持表面干燥，可在37℃的培養箱中倒置放置1-2小時(shí)。

　　

　　弧菌顯色培養基操作步驟

　　

　　1、按國家標準、SN標準、FDA標準或其它方法制備樣品液；

　　

　　2、取1ml樣品液加入9mlSCPB肉湯或堿性蛋白胨水中，37℃增菌培養18-24小時(shí)；

　　

　　3、用3mm接種環(huán)取1環(huán)增菌液，劃線(xiàn)接種到副溶血性弧菌顯色培養基上，做2個(gè)平板；

　　

　　4、37℃培養18-24h，溶血性弧菌顯藍色至藍綠色，霍亂弧菌和其它弧菌顯無(wú)色，其它細菌顯黃色或無(wú)色且菌落很??；

　　

　　5、對可疑菌落可劃線(xiàn)接種到營(yíng)養瓊脂平板上，36±1℃培養12-16小時(shí)，挑取單菌落做副溶血性弧菌全套生化試驗。

　　

　　弧菌顯色培養基制備的基本方法和注意事項

　　

　　1.弧菌顯色培養基配方的選定

　　

　　同一種培養基的配方在不同著(zhù)作中常會(huì )有某些差別。因此，除所用的是標準方法，應嚴格按其規定進(jìn)行配制外．一般均應盡量收集有關(guān)資料．加以比較核對．再依據自己的使用目的加以選用，記錄其來(lái)源。

　　

　　2．培養基的制備記錄

　　

　　每次制備培養基均應有記錄，包括培養推各稱(chēng)，配方及其來(lái)源．和各種成份的牌號。zui終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制各的日期和制備者等，記錄應復制一份，原記錄保存備查，復制記錄隨制好的培養基一同存放、以防發(fā)生混亂。

　　

　　3.弧菌顯色培養基成分的稱(chēng)取

　　

　　培養基的各種成分必須稱(chēng)取并要注意防止錯亂．一次完成，不要中斷?？蓪⑴浞街糜诎鴤?，每稱(chēng)完一種成分即在配方上做出記號，并將所需稱(chēng)取的藥品一次取齊，置于左側，每種稱(chēng)取完畢后，即移放于右側。*稱(chēng)取完畢后．還應進(jìn)行一次檢查。

　　

　　4.弧菌顯色培養基各成份的混合和溶化

　　

　　培養基所用化學(xué)藥品均應是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋，以防有微量銅或鐵混入培養基中，使細菌不易生長(cháng)。使用不銹鋼鍋加熱溶化．也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)擾動(dòng)，以防焦化、如發(fā)現有焦化現象、該培養基即不能使用，應重新制備。待大部分固體成分溶化后，再用較小火力使所有成分*溶化．迄至煮沸。如為瓊脂培養基，應先用一部分水將瓊脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過(guò)程中，因蒸發(fā)而丟失的水分，zui后必須加以補足。

　　

　　5.培養塞pH的初步調整

　　

　　培養基各成分*溶解后，應進(jìn)行pH的初步調正，因培養基在加熱消毒過(guò)程中、pH會(huì )有所變化，例如，牛肉浸液約可降低pH0.2.而腸浸液pH卻會(huì )有顯著(zhù)的升高。因此，對這個(gè)步驟，操作者應隨時(shí)注意探索經(jīng)驗、以期能掌握培養基的zui終pH，保證培養基的質(zhì)量。pH調正后，還應將培養基煮沸數分鐘，以利培養基沉淀物的析出。