用于疫苗生產(chǎn)的Vero細胞

Vero細胞是日本學(xué)者Yasumura等于1962年從正常成年非洲綠猴腎分離獲得的貼附依賴(lài)性細胞系, Vero一詞由世界語(yǔ)中的verde(意為綠色的)和reno意為腎臟的)兩個(gè)詞合并而成。Vero細胞是世界衛生組織和我國生物制品規程認可的疫苗生產(chǎn)細胞系。

與用作疫苗生產(chǎn)的原代細胞、二倍體細胞和其他一些傳代細胞基質(zhì)相比，Vero細胞具有以下特點(diǎn):

①來(lái)源方便，可連續傳代，生長(cháng)速度快;

②對多種病毒的感染敏感、病毒增殖滴度高;

③遺傳性狀穩定，惡性轉化程度低，生物安全性較高;

④培養條件要求不苛刻，易于在生物反應器實(shí)施大規模培養。

疫苗的接種對象主要是大范圍的健康人群，其質(zhì)量和安全性一直是備受關(guān)注的重要問(wèn)題。疫苗的質(zhì)量和安全性在很大程度上取決于疫苗的生產(chǎn)方式和過(guò)程。血清是一種組分復雜而尚不*明確的混合物，至少含有1 000種不同的蛋白質(zhì)，總蛋白量高達60~150g/L，它能為細胞的體外培養提供必要的生長(cháng)因子、激素、細胞貼附因子和營(yíng)養成分。

受Vero細胞自身的貼附依賴(lài)生長(cháng)特性和動(dòng)物細胞培養技術(shù)發(fā)展進(jìn)程的影響，本世紀之前的Vero細胞培養及病毒疫苗生產(chǎn)均存在著(zhù)對血清的依賴(lài)。血清組分的復雜性和不確定性，以及其中存在病毒等病原微生物污染的潛在風(fēng)險，影響著(zhù)病毒疫苗的生產(chǎn)工藝和疫苗質(zhì)量。

從病毒疫苗生產(chǎn)工藝角度考慮，血清組分的復雜性和批次間的質(zhì)量差異增加了病毒疫苗生產(chǎn)的不穩定性和產(chǎn)品質(zhì)量控制的難度;從病毒疫苗的安全性角度考慮，血清中潛在的病原微生物，如引起牛海綿狀腦炎的阮病毒，給疫苗的使用帶來(lái)了不容忽視的安全隱患閻。由血清使用所造成的細胞培養過(guò)程和細胞表達產(chǎn)物安全性的不確定因素增加的現實(shí)問(wèn)題，成為動(dòng)物細胞無(wú)血清培養技術(shù)研究和應用的發(fā)展動(dòng)因。

隨著(zhù)動(dòng)物細胞無(wú)血清培養技術(shù)的不斷進(jìn)步，為包括Vero細胞在內的動(dòng)物細胞大規模無(wú)血清培養技術(shù)的應用提供了必要的技術(shù)支撐，無(wú)血清培養已成為包括疫苗在內的生物技術(shù)藥物生產(chǎn)的總趨勢問(wèn)。2010年，美國、歐盟和日本等發(fā)達國家全面停止在生物制藥中應用血清，FDA停止含血清細胞培養工藝生產(chǎn)的生物技術(shù)新藥的申報受理。

國外報道用可以用HiMedia生產(chǎn)的SFRE 199-1培養基作為Vero無(wú)血清細胞培養基的基礎成分，細胞生長(cháng)較快，狀態(tài)亦佳。SFRE 199-1是對M199培養基的改良型，開(kāi)始用于原代狒狒腎(Bak)細胞的生長(cháng)和維持。

SFRE 199-1添加了胰島素、丙酮酸鈉、硫酸鋅，與M199相比提高了精氨酸-鹽酸、半胱氨酸、胱氨酸、L -谷氨酰胺、L -谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、酪氨酸和葡萄糖的濃度，使其實(shí)現活性較大的同時(shí)而不產(chǎn)生毒性。SFRE 199 -1還添加了半乳糖，以避免乳酸過(guò)度積累，并使pH值在細胞維持期內保持在生理范圍。

另外，SFRE 199系列的還有另一款——SFRE 199-2，SFRE 199-1與SFRE 199-2的不同在于，前者含有Hank's鹽，而后者所含為Earle's鹽。與加胎牛血清的常規培養基比較，細胞生長(cháng)速率、產(chǎn)量和蛋白容量均相同，均在移植后第6天單層細胞達到充分融合，有報道用不加血清的SFRE-199-2培養牛輸卵管峽部上皮細胞和壺腹上皮細胞，體外研究牛的受孕過(guò)程。

締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商，在細胞培養、微生物培養及檢測領(lǐng)域，一如既往地為您帶來(lái)的服務(wù)。