疫苗的作用主要是預防傳染性疾病、新型流行病及暴發(fā)流行,尤其如乙型肝炎呈世界流行,是性的健康問(wèn)題。健康人群是主要的接種對象,因此,保證疫苗的質(zhì)量和安全性是重要的問(wèn)題,其關(guān)鍵在于做好生產(chǎn)方式和過(guò)程的把關(guān),保證生產(chǎn)用原材料的安全和質(zhì)量。在疫苗生產(chǎn)過(guò)程中,為了獲得高滴度高質(zhì)量的病毒培養液,需要高密度的培養細胞基質(zhì)。
細胞高密度培養主要從培養基著(zhù)手,通過(guò)補充某些營(yíng)養添加因子優(yōu)化培養基促進(jìn)細胞生長(cháng)。常用的添加因子是牛血清,它能夠提供給Vero細胞在體外貼附培養的必需物質(zhì),如貼壁因子、生長(cháng)因子、激素、營(yíng)養物質(zhì),在體外模擬穩定的環(huán)境,促進(jìn)細胞高密度生長(cháng)。但是血清是成分復雜的混合物,其所含的組分不*明確,因此,細胞培養技術(shù)中血清的使用存在諸多的缺點(diǎn)和風(fēng)險。
,使用血清較大的風(fēng)險是向疫苗產(chǎn)品中引入血源性病原生物污染的潛能,從而影響疫苗的生產(chǎn)工藝和安全問(wèn)題;
第二,牛血清對細胞具有毒性作用和抑制作用,牛血清的成分復雜,在給細胞提供營(yíng)養的同時(shí)會(huì )負向影響Vero細胞在微載體表面的貼附效果。據文獻報道,培養基添加的牛血清白蛋白易吸附在微載體表面,使細胞在微載體表面的貼附率明顯下降;
第三,血清在質(zhì)量上存在很大的批間差異,增加了疫苗生產(chǎn)工藝的不穩定性和疫苗質(zhì)量控制的難度,從而影響疫苗的質(zhì)量;
第四,血清價(jià)格昂貴,增加了生產(chǎn)工藝規?;糯蟮某杀?;
第五,血清所含的多種雜質(zhì)如蛋白、激素、多肽、細胞因子等給疫苗生產(chǎn)的后續純化工藝增加了困難。
血清的這些不利因素促使動(dòng)物細胞無(wú)血清培養基取代傳統的牛血清培養基已成為病毒性疫苗生產(chǎn)的一個(gè)重要發(fā)展趨勢。
Vero細胞是疫苗生產(chǎn)的常用細胞,常用的基礎培養基有M199、DMEM和F12等,締一生物為您介紹一款適用于Vero細胞的無(wú)血清培養基,由上HiMedia公司生產(chǎn)的M199的改良款——SFRE199-1和SFRE199-2。
SFRE-199系列將M199標準配方中的精氨酸增加到150mg/L,半胱氨酸增至4mg/L,胱氨酸增至40mg/L,谷氨酰胺增至300mg/L,谷氨酸增至75mg/L,甘氨酸增至100mg/l,組氨酸增至40mg/L,酪氨酸增至80mg/L,以獲得較好的細胞生長(cháng)而未表現出毒性。
另外,SFRE-199系列還降低了硝酸鐵、黃嘌呤和碳酸氫鈉的濃度。SFRE 199-1與SFRE 199-2的不同在于,前者含有Hank's鹽,而后者所含為Earle's鹽。與加胎牛血清的常規培養基比較,細胞生長(cháng)速率、產(chǎn)量和蛋白容量均相同,均在移植后第6天單層細胞達到充分融合。
締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商,在細胞培養、微生物培養和檢測領(lǐng)域,一如既往地為您帶來(lái)的服務(wù)。