Vero細胞無(wú)血清培養基在流感疫苗中的應用

流行性感冒（Influenza）簡(jiǎn)稱(chēng)流感，是由流感病毒（Influenza Virus）引起的急性呼吸道疾病，流感病毒具有高度的傳染性和較強的變異性，每年在各個(gè)國家呈季節性流行和地區性爆發(fā)，甚至世界范圍內流行。

面對流感侵襲，人們主要通過(guò)勤洗手、帶口罩或開(kāi)展公眾教育等措施進(jìn)行預防，但這些措施并不十分有效。為有避免流感的侵襲，20世紀40年代，人們通過(guò)雞胚擴增得到的流感疫苗株，用于人類(lèi)的流感預防*。目前，正在使用或正在研發(fā)的針對流感的疫苗包括全病毒疫苗、裂解疫苗、亞單位疫苗及冷適應減毒活疫苗仍是使用雞胚為培養基質(zhì)生產(chǎn)的，然而大流感發(fā)生時(shí)不斷増長(cháng)的疫苗和疫情防控需求使雞胚生產(chǎn)平臺中雞胚供應不足、卵清蛋白過(guò)敏及產(chǎn)量有限等諸多缺陷越來(lái)越明顯。

迫切需要找到一種能快速生產(chǎn)安全有效的流感疫苗的介質(zhì)，世界衛生組織（WHO）推薦利用哺乳動(dòng)物細施培養技術(shù)替代雞胚培養技術(shù)生產(chǎn)流感疫苗。利用細胞培養生產(chǎn)流感疫苗具有顯著(zhù)的優(yōu)點(diǎn)：①細胞培養系統操作簡(jiǎn)單，可實(shí)現大規模培養；②細胞培養系統中繁殖的病毒與原流感病毒分離株的匹配度更高；③雞胚生產(chǎn)的流感疫苗可能引發(fā)人體過(guò)敏反應，而通過(guò)細胞培養制備的疫苗可克服此缺點(diǎn)。

目前可用于流感疫苗生產(chǎn)的細胞系主要有狗腎腫瘤細胞系（MDCK）、非洲綠猴腎細胞系（Vero）、人視網(wǎng)膜細胞系（PER.C6）等。其中Vero細胞系是世界衛生組織（WHO）和我國生物制品規程推薦的人用疫苗生產(chǎn)細胞系，已成功應用于包括流感疫苗在內的多種疫苗的生產(chǎn)，其安全性已得到充分認證。

在疫苗生產(chǎn)過(guò)程中，為了獲得高滴度、高質(zhì)量的病毒液，需要高密度的細胞提供病毒復制的基質(zhì)，為實(shí)現細胞的高密度培養，在體外培養細胞時(shí)會(huì )添加一定量的血清，血清可提供細胞生長(cháng)所需的必需營(yíng)養物質(zhì)，如貼壁生長(cháng)因子、激素、微量元素、載體蛋白等。

使用血清也會(huì )有很多的不足：①血清容易引起細菌、真菌、病毒及支原體的污染，會(huì )增加疫苗生產(chǎn)的安全性隱患；②血清的質(zhì)量在批次間存在很大的差異，影響疫苗生產(chǎn)工藝的穩定性和疫苗質(zhì)量控制；③血清成分復雜，含有多種蛋白質(zhì)、激素、生長(cháng)因子等，増加疫苗等產(chǎn)品連續純化過(guò)程的難度；④血清價(jià)格昂貴，在產(chǎn)品規?；a(chǎn)時(shí)會(huì )増加放大成本；⑤血清中含有能促進(jìn)細胞生長(cháng)的物質(zhì)，但也含有一些對細胞有毒性作用和抑制作用的物質(zhì)，影響細胞的生長(cháng)，血清使用造成的細胞培養過(guò)程和疫苗生產(chǎn)的安全性問(wèn)題及生產(chǎn)成本増加的問(wèn)題，成為動(dòng)物細胞無(wú)血清培養技術(shù)研究和應用的發(fā)展動(dòng)因，因此，基于細胞和產(chǎn)品特性的無(wú)血清培養基研制己成為細胞工程領(lǐng)域的重要課題。

例如：HiMedia公司生產(chǎn)的基礎培養基SFRE系列，是基礎培養基M199的改良款，該系列分為SFRE199-1和SFRE199-2，可用于培養Vero細胞。與M199相比主要區別是提高了葡萄糖和氨基酸的濃度，降低了硝酸鐵、黃嘌呤和碳酸氫鈉的濃度。另外加入硫酸鋅、丙酮酸鈉和魚(yú)精蛋白鋅胰島素。

SFRE 199-1有Hank's鹽；SFRE 199-2含有Earle's鹽，兩款均不含胰島素，需要使用前自行添加?？蔁o(wú)血清培養，與加胎牛血清的常規培養基比較，細胞生長(cháng)速率、產(chǎn)量和蛋白容量均相同，均在移植后第6天單層細胞達到充分融合。

締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商，在細胞培養、微生物培養和檢測領(lǐng)域，一如既往地為您帶來(lái)的服務(wù)。