血清or無(wú)血清培養基的主要優(yōu)缺點(diǎn)

細胞培養基是細胞培養好壞的重要決定因素。近二十年來(lái)，無(wú)血清培養基越來(lái)越受到重視。它不含動(dòng)物血清或其他生物提取液，仍可使細胞在體外較長(cháng)時(shí)間生長(cháng)、增殖或維持。它繼天然培養基、合成培養基之后發(fā)展而來(lái)，尤其應用于哺乳動(dòng)物細胞的大規模工業(yè)培養。同時(shí)，它也是研究細胞生長(cháng)、增殖、分化及基因表達調控的有力工具。

常規培養基在基礎培養基中添加了一定量的血清或組織提取物，它存在以下優(yōu)缺點(diǎn)：

優(yōu)點(diǎn)：

(1)血清作為天然培養基，含有豐富全面的細胞生長(cháng)必需的營(yíng)養，具有極為重要的功能。

(2)提供維持細胞指數生長(cháng)的激素、生長(cháng)因子以及一些低分子營(yíng)養物。

(3)提供的結合蛋白，能識別維生素、脂類(lèi)、金屬和其他激素等，調節其活性。

(4)提供的結合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結合，起到解毒作用。

(5)是細胞貼壁、鋪展所需的因子來(lái)源。

缺點(diǎn):

(1)血清有時(shí)含有細胞生長(cháng)抑制因子和毒性因子，存在潛在毒性。

(2)血清獲取成本高，價(jià)格較貴。

(3)血清由于成分不太明確，，給細胞培養的標準化帶來(lái)困難，同時(shí)也給細胞表達的目的產(chǎn)物純化帶來(lái)困難。

由于常規培養基存在的上述問(wèn)題，無(wú)血清細胞培養基的開(kāi)發(fā)和應用漸成趨勢。無(wú)血清培養可在很大程度上可以避免血清所帶來(lái)的不利，但它同時(shí)也有一些不足。其優(yōu)缺點(diǎn)具體如下：

優(yōu)點(diǎn)：

(1) 其組成明確，可避免血清不同批次帶來(lái)的質(zhì)量變動(dòng)，提高可重復性。

(2)避免血清對細胞的毒性作用和血清源性污染風(fēng)險。

(3)避免血清不明組分對實(shí)驗研究的影響。

(4)有利于體外培養細胞的分化。

(5)可提高細胞產(chǎn)物的表達水平并易于純化。

缺點(diǎn):

(1)細胞在無(wú)血清培養基中易受某些機械和化學(xué)因素的影響，培養基的保存和應用不如傳統的合成培養基方便。

(2)成本較高。

(3)針對性很強，一種無(wú)血清培養基僅適合某一類(lèi)細胞的培養。

(4)無(wú)血清培養基由于營(yíng)養不如血清全面，可能存在潛在的營(yíng)養不足。

締一生物為您介紹一款可用于Vero細胞無(wú)血清培養[1]的SFRE199培養基。它可作為基礎培養基，再添加其他成分后可用于Vero細胞的無(wú)血清培養。它對傳統培養基M199進(jìn)行了改良，開(kāi)始是用于狒狒原代腎細胞的培養，由生物公司HiMedia公司生產(chǎn)。

SFRE-199系列將M199配方中的部分成分進(jìn)行了調整：精氨酸增至150mg/L，半胱氨酸增至4mg/L，胱氨酸增至40mg/L，谷氨酰胺增至300mg/L，谷氨酸增至75mg/L，甘氨酸增至100mg/l，組氨酸增至40mg/L，酪氨酸增至80mg/L，以獲得較好的細胞生長(cháng)而未表現出毒性。

SFRE199-1和SFRE199-2二者均含有L-谷氨酰胺、半乳糖和葡萄糖。SFRE M199-2（貨號AT090）含有Earle's鹽，而SFRE M199-1含有Hank鹽。兩種鹽的主要差別在于碳酸氫鈉的水平, 碳酸氫鈉在Eagles (2.2g/L)比在Hanks (0.35g/L) 中高。選用哪種取決于培養環(huán)境中的CO2濃度。

參考文獻

[1] Jack Litwin.The growth of Vero cells in suspension as cell-aggregates in serum-free media. State Bacteriology Laboratory, 105 21 Stockholm, Sweden.

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