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顯色培養基的保存條件很苛刻,應該怎么保存

更新時(shí)間:2019-03-20  |  點(diǎn)擊率:832
     顯色培養基的保存條件很苛刻,應該怎么保存
  一般是在分離培養基中加入檢測某些菌種的特異性酶底物。該底物由產(chǎn)色基團和微生物可代謝物質(zhì)組成,通常為無(wú)色。但在特異性酶作用下游離出發(fā)色基團并顯示一定顏色,直接觀(guān)察菌落顏色即可對菌種做出鑒定。
  顯色培養基通常為干粉狀,容易保存。加蒸餾水溶解后,也無(wú)須高壓滅菌,煮沸即可倒平板,劃線(xiàn)接種,置適宜溫度下培養一定時(shí)間即可。培養時(shí)間依具體培養基而定,通常是18-24小時(shí),比傳統時(shí)間顯著(zhù)縮短。
  顯色培養基是一類(lèi)利用微生物自身代謝產(chǎn)生的酶與相應顯色底物反應顯色的原理來(lái)檢測微生物的新型培養基。這些相應的顯色底物是由產(chǎn)色基因和微生物部分可代謝物質(zhì)組成,在特異性酶作用下,游離出產(chǎn)色基因顯示一定顏色,直接觀(guān)察菌落顏色即可對菌種作出鑒定。它是一種新型分離培養基,利用顯色培養基進(jìn)行微生物的篩選分離,其反應的靈敏度和特異性大大優(yōu)于傳統培養基。
  有研究人員用7種干擾菌對傳統培養基和顯色培養基進(jìn)行了測試,仍然發(fā)現顯色培養基的抗干擾能力更強,不過(guò)也同時(shí)指出,BS平板與顯色培養基搭配起來(lái)效果更好。
  顯色培養基保存的步驟:
 ?。ㄒ唬蚀_稱(chēng)量試劑:根據不同的菌類(lèi)和用途,選擇適宜的培養基,培養基所需試劑必須純凈。
 ?。ǘ┬U齪H值:將稱(chēng)量好的培養基各種成分放入容器內,標記劃線(xiàn),加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1NNaOH和1NHCl調節pH值到適宜范圍內。
 ?。ㄈ┻^(guò)濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養基倒入其中過(guò)濾至透明。
 ?。ㄋ模┓盅b:將過(guò)濾后的培養基分裝于中試管或三角瓶?jì)龋ㄔ嚬軆让恐аb5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
 ?。ㄎ澹缇号囵B基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營(yíng)養細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。
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