新生牛血清中微生物的電鏡檢查

新生牛血清是細胞大規模培養用于生產(chǎn)疫苗、生物藥及病毒載體的重要原材料，也是細胞學(xué)實(shí)驗常用的天然培養基。它的質(zhì)量好壞對細胞形態(tài)及生長(cháng)情況的影響很大，尤其是要保證其無(wú)微生物的污染，因為微生物對細胞的污染會(huì )造成實(shí)驗結果的偏差，對生物制品的安全性也構成威脅。國內外的相關(guān)部門(mén)都提出了一系列的質(zhì)量檢測指標。但也有人指出其不足，如對外源微生物的檢測項目較少、不能涵蓋所有微生物的檢測；檢測度也受到方法本身的限制而不能達到很高的水平。為此, 建立快速、、廣譜的新生牛血清外源因子檢測方法是非常必要的。

有生物制品機構開(kāi)發(fā)出電鏡監測微生物的方法。其主要采取的是膜表面富積法來(lái)制備電鏡樣品。將有膜電鏡載網(wǎng)放入裝有新生牛血清的離心管中, 5000 rPmin 離心, 然后取出載網(wǎng)負染。同時(shí)設立實(shí)驗組和對照組。對于細菌，設置電鏡放大1萬(wàn)倍，觀(guān)察時(shí)間為 30分鐘, 當5 分鐘內檢出細菌記為/ + + + , 10分鐘檢出細菌記為/ + + , 30 分鐘內檢出記為/ +。對于病毒，設置電鏡放大3萬(wàn)倍，借助目鏡觀(guān)測, 5分鐘內檢出 n種記為/ n+ + +，10分鐘內檢出記為/ n+ +，30分鐘內檢出記為/ n+。研究人員選擇了三種國內外不同新生牛血清的牌子，每個(gè)牌子的血清又選擇了3-10個(gè)批次。結果顯示，用培養基進(jìn)行無(wú)菌檢測時(shí)，大部分做的比較好，只有一個(gè)牌子的一個(gè)批次出現細菌檢測陽(yáng)性，其余皆陰性。但用電鏡檢查時(shí)，對照組皆為陰性，但實(shí)驗組的大部分都是陽(yáng)性（陽(yáng)性率高達95.6%）。病毒的陽(yáng)性率為34.8%。具體病毒的部分檢測圖像如下：

在方法上，作者認為，與膜表面富積法制備的新生牛血清電鏡樣品相比, 常規負染法只能獲得極少的觀(guān)測視野, 且附著(zhù)粒子極少。而膜表面富積法所制樣品可以在每個(gè)網(wǎng)孔取得觀(guān)測視野，粒子附著(zhù)率應提高104~105倍。該方法只要求血清中的微生物數量, 不要求微生物的顆粒密度，這樣即使在微生物密度極低的情況下, 也能有效利用電鏡進(jìn)行有效檢測。

作者認為，對于污染程度極低的血清, 要經(jīng)過(guò)多個(gè)數量級的放大后才能在細胞

培養中體現出來(lái)。而采用針對性強的病毒檢測方法不能保證血清*避免病毒污染。因此，新生牛血清生產(chǎn)企業(yè)應不斷改進(jìn)生產(chǎn)和檢測工藝, 提高產(chǎn)品的質(zhì)量, 滿(mǎn)足使用單位不斷提高的質(zhì)量要求。

Ausbian精制新生牛血清系新西蘭血源，澳洲生產(chǎn)，出廠(chǎng)前經(jīng)嚴格質(zhì)控，符合各項標準。血清經(jīng)過(guò)0.22微米過(guò)濾和15kGy的gamma射線(xiàn)照射滅能，可殺滅細菌、支原體，無(wú)微生物風(fēng)險，可滿(mǎn)足廣大用戶(hù)對新生牛血清的品質(zhì)需求。

品名：Ausbian精制新生牛血清

貨號：VS500N

批號：1712A

規格：500ml/瓶

市場(chǎng)價(jià)：1600元

歡樂(lè )價(jià)：800元

*活動(dòng)：買(mǎi)10瓶送3瓶，100瓶送40瓶

參考文獻

中國生物制品學(xué)雜志2004 年9 月第 17 卷第 5 期

新生牛血清中微生物的電鏡檢測及結果分析

作者：劉建華 梁 本 王殿軍 鄭曉麗 藍志金 周麗微