細胞體外培養應注意的方面

細胞培養是很重要的一門(mén)技術(shù)。其培養效果受到多方面影響，可匯總如下：

1、溫度。細胞生長(cháng)需要適宜的溫度。通常來(lái)說(shuō)，人和哺乳動(dòng)物的細胞培養溫度要在35-37℃，鳥(niǎo)類(lèi)細胞培養在38.5℃較好，鼠類(lèi)細胞在34℃適宜生長(cháng)。細胞對低溫的耐受力比高溫強。

2、分離方法

常用的分離方法有組織塊分離法和酶消化分離法。也有使用抗體或磁珠包被的抗體分離細胞。

3、培養液

1）血清：細胞培養時(shí)血清的濃度要控制在5%~20%，過(guò)高或過(guò)低的血清濃度都不利于細胞的生長(cháng)和增殖。當然，也可以使用特別配制的商品化的無(wú)血清培養基。

2）激素和生長(cháng)因子：不同的細胞需要不同的激素和因子。常見(jiàn)有：雌二醇、孕酮、表皮生長(cháng)因子、成纖維細胞生長(cháng)因子。許多激素和因子對細胞有促增殖、分化作用。

3）抗生素：常用的抗菌素是青霉素和鏈霉素。此外,卡那霉素、新霉素、兩性霉素、氯霉素、潮霉素都可以防止細胞培養過(guò)程中細菌和真菌的感染。

4）支持物：有些貼壁細胞需要特定的支持物。常見(jiàn)的支持物有滋養細胞或生長(cháng)基質(zhì)（如膠原等）。

4、接種的細胞密度：細胞密度過(guò)高和過(guò)低均不利于細胞生長(cháng)。

培養液的pH值：不同種動(dòng)物或是同一種動(dòng)物的不同部位對pH的要求各不相同。一般情況下，動(dòng)物細胞培養液的pH值一般在7.2-7.4。除文獻報道外，自己也可進(jìn)行摸索。如培養瓶蓋已松口，與外界氣體存在交換，培養箱內的CO2濃度以及培養液中的緩沖鹽成分及濃度也可影響培養液的pH值。

品名：Ausbian精制新生牛血清

貨號：VS500N

批號：1712A

規格：500ml/瓶

市場(chǎng)價(jià)：1600元

歡樂(lè )價(jià)：800元

*活動(dòng)：買(mǎi)10瓶送3瓶，100瓶送40瓶

上海締一生物提供的Ausbian精制新生牛血清(γ照射)，是在新西蘭政府獸醫管理局監管下的出口注冊屠宰場(chǎng)采集的。血清經(jīng)過(guò)0.22微米過(guò)濾和15kGy的gamma射線(xiàn)照射，減少了存在微生物的風(fēng)險。同時(shí)檢測過(guò)細胞毒效應，確保沒(méi)有病毒。在病毒分離方面，均未檢出BVD（牛病毒性腹瀉病毒） 、PI-3（牛副流感病毒3型）、IBR（牛傳染性鼻氣管炎） ，質(zhì)量有保證，且價(jià)格正在優(yōu)惠期。

參考文獻

黃蘭蘭,等. 影響動(dòng)物細胞體外培養因素. 黑龍江動(dòng)物繁殖. 2005,13(4):16-19