動(dòng)物細胞的灌注培養

動(dòng)物細胞的培養技術(shù)自上世紀初出現以來(lái)，經(jīng)歷了一個(gè)多世紀的發(fā)展，獲得了很大的進(jìn)步。不僅建立了許多細胞系和培養了許多類(lèi)型的原代細胞，而且開(kāi)發(fā)了人工合成培養基和無(wú)血清培養基，并且出現了細胞工程，哺乳動(dòng)物細胞的大規模培養獲得了工業(yè)化的應用，用于生產(chǎn)重組蛋白、單克隆抗體等生物藥、載體病毒、病毒性疫苗等。開(kāi)發(fā)了微載體、中空纖維管和生物反應器等，并且實(shí)現了一種不同以往的培養方式——灌注培養。目前，灌注培養已成為高產(chǎn)率培養細胞的主要方法。

灌注培養是一種動(dòng)態(tài)培養，可提供不斷流動(dòng)的培養液和消除有害的代謝產(chǎn)物。它包括蠕動(dòng)泵、熱板、組織載體、氣體擴張器、配套的培養瓶和管子。蠕動(dòng)泵用于控制通過(guò)培養箱的培養液流速。熱板向培養箱提供37 ℃的維持溫度。氣體擴張器用于消除管道中的氣泡。

灌注培養有四個(gè)特點(diǎn)：一是能及時(shí)地補充營(yíng)養物質(zhì)和排出代謝產(chǎn)物，有利于細胞的擴增，實(shí)現高密度培養；二是提供穩定的環(huán)境，有利于細胞的持續增殖；三是可實(shí)現梯度培養，如梯度培養箱的腔面和基底面分別用不同的培養液灌注，更接近體內環(huán)境，可用于體外三維組織工程的構建。四是灌注培養檢測廢液中葡萄糖和乳酸濃度，進(jìn)而更清楚當前細胞培養微環(huán)境情況。

在組織工程上的實(shí)踐顯示，灌注培養有利于體外高活性有功能軟骨組織工程的構建。灌注培養得到的DN A和糖胺聚糖的含量明顯增高，比用靜態(tài)培養的含量多。

灌注培養可用含血清的培養基。但無(wú)血清培養基已成為發(fā)展的趨勢。只是無(wú)血清開(kāi)發(fā)成本高，應用范圍窄，尚未全部替代含血清培養基。

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參考文獻

唐光霞, 陳建蘇. 灌注動(dòng)物細胞培養及其在組織工程中的應用進(jìn)展.眼科新進(jìn)展.2010,30(5):486-491