檢測水中大腸埃希氏菌O157：H7的HiMedia顯色培養基

現在，市面上能見(jiàn)到的顯色培養基大多用于食品和臨床，但HiMedia廠(chǎng)家生產(chǎn)的顯色培養基覆蓋面廣，能用于供水行業(yè)和環(huán)境監測站。下面為您介紹一下。

顯色培養基的評價(jià)常有多個(gè)指標，如靈敏度，特異性等，它們也與所檢測的樣本類(lèi)型有關(guān)。生產(chǎn)廠(chǎng)家經(jīng)常不提供這些指標。但一些第三方檢測中心或研究機構對此則有相關(guān)研究，并發(fā)表在專(zhuān)業(yè)期刊上。

2011年，《學(xué)術(shù)研究期刊》發(fā)表了一篇對顯色培養基的比較研究。作者來(lái)自埃及國家研究中心水污染研究部，他們通過(guò)用顯色培養基檢測了水中的大腸埃希氏菌O157:H7，對顯色培養基進(jìn)行了評價(jià)（見(jiàn)參考文獻1）。

作者指出，在水中，E. coli O157:H7可以極低水平存在，伴隨大量競爭菌群。傳統方法需要超過(guò)48小時(shí)完成培養，同時(shí)還需進(jìn)一步的生化鑒定和血清學(xué)鑒定。依據原理主要是SMAC平板，在麥康凱瓊脂基礎上用山梨醇替代乳糖，E. coli O157:H7不能發(fā)酵山梨醇。該方法存在一定的偏差，因為有些E. coli O157:H7菌株可以發(fā)酵山梨醇。

顯色培養基的出現可改善這一檢測方法。研究者采用HiMedia公司生產(chǎn)的HiCrome EC O157:H7 Selective agar。因為存在特異性顯色底物，E. coli O157:H7菌落呈現深紫色，E. coli菌落則呈現淡粉色至淡紫色。

研究者收集了尼羅河地表水的60個(gè)水樣本。收集水平遵照了200年APHA發(fā)布的指南。所有水樣均收集在無(wú)菌的1L玻璃瓶中（Simax品牌，捷克共和國產(chǎn)），并在4℃條件下運輸到實(shí)驗室。所有樣品在收集后6小時(shí)內進(jìn)行細菌學(xué)檢查。

研究用的E. coli O157:H7標準菌株編號為ATCC 43895。研究者除采用了HiMedia出的HiCrome EC O157:H7 Selective agar（簡(jiǎn)稱(chēng)HEC）外，還采用了美國B(niǎo)iolog 產(chǎn)的Rainbow agar O157（簡(jiǎn)稱(chēng)RB）。該平板為無(wú)色，在上面E. coli菌落呈現紅紫藍黑等不同顏色，E. coli O157:H7呈現深灰色至深黑色。而其他葡萄糖醛酸酶陽(yáng)性菌株呈現紅色或洋紅色菌落。該培養基添加有新生霉素和亞碲酸鹽。

研究遵循了2005年APHA指南，采用薄膜過(guò)濾法對E. coli O157:H7進(jìn)行了檢測和計數。濾膜放置在培養基上，37℃倒置孵育24小時(shí)。對典型菌落計數，單位為CFU/100 ml。菌落的進(jìn)一步確證采用PCR法。終計算得出靈敏度（真陽(yáng)性率）、特異性（真陰性率）、總有效率（即（真陽(yáng)性+真陰性）×100/總數），并進(jìn)行統計學(xué)分析（t檢驗）。

結果見(jiàn)表1、表2、表3和表4。

表1. 在不同培養基上，E. coli O157:H7標準菌株的菌落特征

表2. 非E. coli O157:H7菌株在不同培養基上的菌落情況

表3. 培養基分離標準菌株的有效性

表4. 60個(gè)尼羅河水樣在不同培養基上E. coli O157:H7的假陽(yáng)性率

可見(jiàn)，HiCrome EC O157:H7 Selective agar分離E. coli O157:H7具有更高的靈敏度和特異度，并已被PCR進(jìn)一步確證。顯色培養基不失為一種靈敏、快速、特異的方法，并且無(wú)須任何確證試驗。

HiMedia公司是微生物產(chǎn)品生產(chǎn)商，具有40多年生產(chǎn)研發(fā)經(jīng)驗，具有WHO-GMP認證、ISO9001，ISO13485質(zhì)量體系認證和CE、FDA注冊登記。產(chǎn)品已行銷(xiāo)世界上140多個(gè)國家。

締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商，在微生物培養和檢測領(lǐng)域，一如既往地為您帶來(lái)的服務(wù)。