微生物法測定維生素B12，要用優(yōu)質(zhì)培養基

維生素B12，是人體必需維生素，在維持機體正常造血和神經(jīng)功能健全中起到至關(guān)重要的作用。因此，對于嬰幼兒配方乳品和營(yíng)養補充食品中，測定維生素B12十分必要。

我國《GB 5413.14—2010食品安全國家標準 嬰幼兒食品和乳品中維生素B12的測定》規定了采用萊士曼氏乳酸桿菌（ATCC 7830）測定維生素B12的整個(gè)流程。實(shí)際亦有多篇報道，肯定了微生物法的準確可靠，并且測定樣品還包括腸內營(yíng)養粉劑、多維元素片、維生素飲料以及含乳飲料等［1-4］。

微生物法的原理是，根據試驗菌株對微生物B12的特異性和靈敏性，在含有除維生素B12以外所有營(yíng)養的【測定培養基】中，加入標準曲線(xiàn)工作液以及未知待測樣品溶液，根據微生物生長(cháng)產(chǎn)生的透光率，對待測樣本中微量的微生物B12進(jìn)行測定。

其中，測量的準確度尤其依賴(lài)于維生素B12在一定濃度范圍內與透光率呈現良好的線(xiàn)性關(guān)系。而是否呈良好的線(xiàn)性，又與所用的【測定培養基】有很大的關(guān)系。有機構采用了不同品牌的【維生素B12測定培養基】進(jìn)行測定，發(fā)現兩個(gè)國產(chǎn)品牌培養基的接種空白依然有生長(cháng)，勉強可獲得標準曲線(xiàn)，但線(xiàn)性結果不理解。而進(jìn)口品牌的“標準曲線(xiàn)明顯梯度正生長(cháng), 獲得較理想的標準曲線(xiàn), 線(xiàn)性結果較理想”［5］。

參考文獻

1. 蔣孟虹，許蘋(píng)，秦峰，劉浩，楊美成. 微生物法測定腸內營(yíng)養粉劑中微量維生素B12的含量［J］.食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報,2016,7(3):893-897

2. 盧京光，裴琳，楊龍華．在線(xiàn)微生物濁度法測定多維元素片中微量維生素B12的含量[J]．藥物分析雜志,2011,031(009):1837-1839

3. 陳亞波，周敏，楊彤．微生物法測定維生素飲料中的維生素B12[J]．浙江農業(yè)科學(xué)，2013,000(007):863-865

4. 林耀文，佘之蘊，李姣，蘇妙儀，范安妮，張施敬，王力清．微生物法測定含乳飲料中維生素B12含量[J]．飲料工業(yè),2013,016(004):39-42

5. 陳緒華, 劉健, 江一飛. 不同測定培養基對維生素B12線(xiàn)性的影響[J]. 生物技術(shù)世界, 2013(04):53+131

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生產(chǎn)商HiMedia Laboratories是著(zhù)名的微生物培養基供應商，

生產(chǎn)工藝均通過(guò)WHO-GMP、ISO9001、ISO13485認證，

【維生素B12測定培養基】在CE和FDA具有注冊登記。

產(chǎn)品信息

中文：維生素B12測定用培養基

英文：Vitamin B12 Assay Medium

品牌：HiMedia®

規格：100G/瓶

貨號：M036

儲存溫度：8℃下密閉保存，理想是放置于干燥器中。

質(zhì)控

該產(chǎn)品出廠(chǎng)前經(jīng)廠(chǎng)家嚴格檢測，確保合格后方予放行。具體質(zhì)控包括：

外觀(guān)（粉末顏色、均一度、是否結塊）

溶水后的培養基顏色和透明度

pH值（8.5% 水溶液，25℃）

培養反應（對萊士曼乳酸桿菌ATCC 7830 在35-37℃培養18-24小時(shí)）

生長(cháng)試驗（用美國藥典維生素B12標準品，每管分別加入0.0,0.025,0.050,0.075,0.1,0.125,0.150和0.2ng，觀(guān)察菌株的連續生長(cháng)狀況，在620nm測定吸光度）

（注：分別為對照，空白，標準品1，標準品3，標準品5）

優(yōu)勢

該產(chǎn)品不含痕量維生素B12，有效避免標準曲線(xiàn)偏移和本底過(guò)高，結果準確可靠。