如何檢查胎牛血清中的病毒

胎牛血清作為天然培養基被實(shí)驗室和科研單位廣泛使用，它富含細胞生長(cháng)中的各種營(yíng)養成分，但是也容易受到病毒感染，從而給細胞培養帶來(lái)潛在的干擾。

在美國，胎牛血清的病毒檢查遵循著(zhù)9 CFR 113.52 、9 CFR 113.53聯(lián)邦法令，并以獸藥委員會(huì )（CVMP）關(guān)于免疫性獸藥生產(chǎn)中應用牛血清的指南文件（EMEA/CVMP/743/00-Rev.2）、專(zhuān)li藥委員會(huì )（CPMP）關(guān)于生物藥生產(chǎn)中牛血清應用指南的文件（EMEA/CPMP/BWP/1793/02）為參考，并在美國藥典（USP）中有所描述。而我國在藥典中目前只有有關(guān)新生牛血清的質(zhì)檢規定，還沒(méi)有胎牛血清的內容。

在USP提到病毒檢查中，建議使用兩種或兩種以上的細胞系作為檢測細胞，其中一種細胞系應為牛源。檢測時(shí)，添加15%的待測牛血清培養細胞至少21天，期間細胞至少傳代兩次。之后觀(guān)察是否存在病毒的擴增。如用顯微鏡觀(guān)察是否存在細胞病變效應（例如由牛鼻支氣管炎病毒導致）、細胞染色和鏡下包涵體檢查、血吸附檢查（(牛副流感3型病毒），并在此基礎上進(jìn)行針對如下病毒的特異性的免疫熒光抗體檢查：

牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）

牛細小病毒

牛腺病毒

牛蘭舌病毒

牛呼吸道合胞病毒

呼腸弧病毒

狂犬病病毒

病毒還可以在電鏡下觀(guān)察，更直觀(guān)，更全面。但電鏡需要相應的儀器，樣本也需要一定的制備過(guò)程。

chang用的病毒檢查方法還是免疫檢查（這個(gè)特異性gao）、血吸附檢查和細胞病變效應。后兩個(gè)檢查是通用的病毒檢查，不具有病毒特異性，且二者可以互補。一些病毒為血吸附病毒，含有血凝素（HA），可以引起紅細胞的聚集；另外一些病毒則可造成細胞變性，引起受染細胞發(fā)生聚集、脫落、融合，形成包涵體，甚至損傷、死亡。這些恃征性的改變，稱(chēng)為細胞病變效應，它可在低倍顯微鏡下直接觀(guān)察。

許多胎牛血清在質(zhì)控證書(shū)上都會(huì )注明檢查的病毒種類(lèi)和結果。如Ausbian®特級胎牛血清在COA即會(huì )注明廠(chǎng)家開(kāi)展的這些檢測。

總之，確定牛血清沒(méi)有病毒感染，無(wú)論對于細胞培養，還是疫苗生產(chǎn)，都具有非常重要的意義。

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