論動(dòng)物細胞的灌注培養

動(dòng)物細胞的培養技術(shù)自上世紀初出現以來(lái)，經(jīng)歷了一個(gè)多世紀的發(fā)展，獲得了很大的進(jìn)步。不僅建立了許多細胞系和培養了許多類(lèi)型的原代細胞，而且開(kāi)發(fā)了人工合成培養基和無(wú)血清培養基，并且出現了細胞工程，哺乳動(dòng)物細胞的大規模培養獲得了工業(yè)化的應用，用于生產(chǎn)重組蛋白、單克隆抗體等生物藥、載體病毒、病毒性疫苗等。開(kāi)發(fā)了微載體、中空纖維管和生物反應器等，并且實(shí)現了一種不同以往的培養方式——灌注培養。目前，灌注培養已成為高產(chǎn)率培養細胞的主要方法。

灌注培養有四個(gè)特點(diǎn)：

一是能及時(shí)地補充營(yíng)養物質(zhì)和排出代謝產(chǎn)物，有利于細胞的擴增，實(shí)現高密度培養；

二是提供穩定的環(huán)境，有利于細胞的持續增殖；

三是可實(shí)現梯度培養，如梯度培養箱的腔面和基底面分別用不同的培養液灌注，更接近體內環(huán)境，可用于體外三維組織工程的構建。

四是灌注培養檢測廢液中葡萄糖和乳酸濃度，進(jìn)而更清楚當前細胞培養微環(huán)境情況。

灌注培養可用含血清的培養基。但無(wú)血清培養基已成為發(fā)展的趨勢。只是無(wú)血清開(kāi)發(fā)成本高，應用范圍窄，尚未全部替代含血清培養基。 

目前市面上的血清品牌很多，可重點(diǎn)關(guān)注締一生物提供的進(jìn)口Ausbian精制新生牛血清。一般新生牛血清應具有如下特點(diǎn)：

1. 內毒素低，內毒素選取小于3Eu/ml，可以使細胞更健康。對于客戶(hù)做實(shí)驗更加順利。如果選取內毒素較高的血清，細胞一直泡在毒液里，短期內試不出結果，用不健康的細胞做實(shí)驗，對實(shí)驗結果造成嚴重影響。

2. 原裝試用，保證后續供貨為同一個(gè)批次?？蛻?hù)試用好后對于購買(mǎi)的血清更加有把握，同一批次已經(jīng)試過(guò)了，也保證了實(shí)驗更加順利。
3. 同一個(gè)批次數量多，2000瓶，可以長(cháng)期不用換批次。保證了實(shí)驗更加順利的同時(shí)，節省了試用的時(shí)間和成本。
4. 多個(gè)批次可以選擇。不限一次試用，可以適應不同課題。以保障實(shí)驗順利。

5. 多個(gè)課題組，客戶(hù)在使用。相當于多個(gè)角度測試該批次血清，說(shuō)明血清對于細胞實(shí)驗的支持，保證了實(shí)驗順利。

符合要求的血清可用于細胞培養。

參考文獻

唐光霞, 陳建蘇. 灌注動(dòng)物細胞培養及其在組織工程中的應用進(jìn)展.眼科新進(jìn)展.2010,30(5):486-491

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