人骨髓間充質(zhì)干細胞的培養

人軟骨損傷后，可用軟骨組織工程進(jìn)行軟骨缺損修復。軟骨可由間充質(zhì)干細胞分化而來(lái)。因而，間充質(zhì)干細胞的培養和分化具有重要作用。

間充質(zhì)干細胞（MSC）可以2×10的5次方／cm2的密度接種于特定的培養液(低糖DMEM，含15％FBS，100u/L氨卡青霉素，100 mg／L鏈霉素，250 mg／L兩性霉素)中，置于37℃、5％CO2和飽和濕度的孵箱內培養。3 天后更換培養液，小心棄去未貼壁細胞。以后每3天換液一次。

MSC體外擴增時(shí)，是待細胞長(cháng)至鋪滿(mǎn)瓶底80％時(shí)，用0.1％胰蛋白酶和0.01％ EDTA(1:1)消化傳代，再以(6～8)×10³／cm2的密度接種傳代培養。以后各代均以此密度傳代擴增。

一些廠(chǎng)家已提供間充質(zhì)干細胞無(wú)血清培養基，但價(jià)格不菲。也可考慮用質(zhì)量較好的胎牛血清加DMEM進(jìn)行培養。

質(zhì)量較高的胎牛血清會(huì )非常適合干細胞的培養。它被眾多國家重點(diǎn)實(shí)驗室和細胞典藏項目長(cháng)期選擇。下面這個(gè)品牌的血清供參考。

Ausbian®特級胎牛血清

Ausbian Fetal Bovine Serum，Sterile

規格：500ml/瓶    

貨號：VS500T/WS500T

產(chǎn)品描述

Ausbian®特級胎牛血清是采自5-8個(gè)月胎齡牛胚胎中的胎血。此時(shí)胎牛各臟器正處生長(cháng)分化階段，血中含有豐富的生長(cháng)發(fā)育因子，非常適合各種細胞的培養。

所有Ausbian®特級胎牛血清出廠(chǎng)前均應經(jīng)過(guò)嚴格質(zhì)控，并附有詳細的《檢測報告》，檢查指標齊全，如理化檢查、外源因子檢查和促細胞生長(cháng)能力等。

Ausbian®胎牛血清均在澳洲當地政府獸醫部門(mén)的監督下從注冊的出口屠場(chǎng)采集，符合動(dòng)物協(xié)會(huì )要求。

Ausbian特級胎牛血清的優(yōu)勢是：

1、精選內毒素更低批次（≤3EU/ml），使細胞更健康，培養更順利。干細胞對內毒素非常敏感，如果血清中內毒素≥3EU/ml時(shí)，干細胞很容易死亡。因此，挑選更低的內毒素，是保證實(shí)驗順利的第yi步。

2、七次無(wú)菌過(guò)濾，后三次為0.1 µm無(wú)菌過(guò)濾處理。

3、進(jìn)行全面的細菌、真菌、支原體、病毒及病毒抗體檢測，保證安全性。

4、提供試用服務(wù)，養細胞更放心。

5、每個(gè)批次產(chǎn)量為2000-3000瓶，試用滿(mǎn)意的實(shí)驗室批號優(yōu)先鎖定，保證大多數項目?jì)赡瓴恍钃Q批次，細胞試驗數據穩定。

6、每年按序推出多個(gè)新鮮生產(chǎn)批次，平行供應，倉儲穩定。

7、Viansaga的防偽標簽，保證不會(huì )有假貨。保證了實(shí)驗的順利，也避免了假貨造成的成本損失。

總之，胎牛血清在細胞培養成分中占有重要位置，應選用質(zhì)量好的胎牛血清，千萬(wàn)不可圖便宜。

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