過(guò)敏反應有助于抵抗細菌感染

過(guò)敏反應是歐洲常見(jiàn)的疾病之一，據估計，超過(guò)1.5億歐洲人反復出現過(guò)敏反應，到2025年，這一比例可能會(huì )增加到整個(gè)歐洲人口的一半。過(guò)敏反應患者初會(huì )經(jīng)歷“致敏”，這意味著(zhù)它們的免疫系統會(huì )發(fā)育出一類(lèi)特定的抗體，即所謂的免疫球蛋白E抗體（IgE），它可以識別外部蛋白質(zhì)，稱(chēng)為過(guò)敏原。 IgE與表達特定受體FcεR1的細胞結合并相互作用。體內只有少數表達FcεR1受體的細胞類(lèi)型，而重要的細胞可能是肥大細胞，這是在全身大多數組織中都能找到的一種免疫細胞。

當再次暴露于過(guò)敏原時(shí)，肥大細胞（IgE與其FcεR1受體結合）立即通過(guò)迅速釋放引起經(jīng)典過(guò)敏反應癥狀的不同介質(zhì)（例如組胺，蛋白酶或細胞因子）進(jìn)行反應。這些癥狀取決于與過(guò)敏原發(fā)生接觸的組織，癥狀范圍包括打噴嚏/喘息（呼吸道）到腹瀉和腹痛（胃腸道）或瘙癢（皮膚）。全身接觸過(guò)敏原可以同時(shí)激活來(lái)自不同器官的大量肥大細胞，引起全身性過(guò)敏反應。

盡管進(jìn)行了數十年的研究并且對IgE和肥大細胞在過(guò)敏中的關(guān)鍵作用有詳盡的了解，但是人們對這種“過(guò)敏現象”背后的生理學(xué)機制仍未*了解。 2006年， Stephen J. Galli及其在斯坦福大學(xué)的實(shí)驗室揭示了肥大細胞對于先天抵抗某些蛇毒和蜜蜂的毒液的重要性。 Galli實(shí)驗室的后續工作表明，“過(guò)敏反應”在獲得性宿主防御高劑量毒液的防御中起著(zhù)關(guān)鍵作用。

緊隨這一發(fā)現之后，維也納醫科大學(xué)和CeMM的高級博士后研究員Philipp Starkl，維也納醫科大學(xué)和CeMM PI的教授Sylvia Knapp以及斯坦福大學(xué)醫學(xué)院的Stephen J. Galli一起，及其同事著(zhù)手研究此現象是否可能與防御其他產(chǎn)生毒素的生物，特別是病原細菌有關(guān)。作者選擇了金黃色葡萄球菌作為病原體模型，因為它具有巨大的臨床意義和廣泛的毒素庫。該細菌是耐抗生素的原型病原體，并且還與哮喘和特應性皮炎等疾病中過(guò)敏性免疫反應的發(fā)展有關(guān)。

科學(xué)家發(fā)現，患有輕度金黃色葡萄球菌皮膚感染的小鼠會(huì )產(chǎn)生適應性免疫反應和針對細菌成分的特異性IgE抗體。當這些小鼠面臨嚴重的繼發(fā)性肺或皮膚和軟組織感染時(shí)，這種免疫反應使它們具有更高的抵抗力。但是，缺乏功能性IgE效應子機制或肥大細胞的小鼠無(wú)法建立這種保護。這些發(fā)現表明，針對細菌的“過(guò)敏”免疫反應不是病理性的，而是保護性的。因此，防御產(chǎn)生毒素的病原細菌可能是過(guò)敏模塊的重要生物學(xué)功能。

支原體污染會(huì )影響細胞生長(cháng),狀態(tài)變差。部分細胞有支原體污染后仍能正常生長(cháng)，細胞與支原體長(cháng)期共存，但不明顯的支原體污染也會(huì )對細胞實(shí)驗結果產(chǎn)生影響，出現實(shí)驗結果難以理解，重復性差等問(wèn)題。 本文締一生物為您分析細胞中支原體的祛除方法。

一、

Zell Shield®支原體祛除劑（培養基用）

英文名：Zell Shield®

品牌：德國MB

用途和用法：

1. 適用范圍

（1）細胞已發(fā)生支原體污染，但又不愿丟棄，希望繼續培養（如已轉染或大量擴增的細胞）。

（2）初始培養的原代細胞。

（3）存在支原體污染高風(fēng)險的細胞。

2. 用法：

（1）1:100加入培養基。

（2）當細胞存在支原體污染時(shí)，應先對細胞懸浮沖洗三次，再用含Zell Shield®培養基培養。每次傳代前都應做懸浮沖洗處理。連續傳代4次，支原體即可祛除。

二、

Mynox® Gold支原體祛除劑

（珍貴細胞保種用）

英文名：Mynox® Gold

品牌：德國MB

1. 適用范圍

被支原體污染的珍貴細胞或不易獲得的生物樣本（如細胞種子）。

2. 用法：

步驟1. 將「*治療液」加入到4.5ml培養基（FBS需≤5%）中，培養細胞（細胞數為104~105）。

步驟2. 細胞長(cháng)至80%-90%匯合時(shí)，細胞傳代。將1管「鞏固防護液」加到9.5ml培養基中，用該培養基繼續培養。

步驟3. 重復步驟2，細胞再傳代2次，支原體即*祛除。

注意：每次傳代時(shí)，盡量都能把細胞懸浮沖洗三次，可取得更好的治療效果。

三、

Mynox支原體祛除劑

（珍貴樣本用）

英文名：Mynox®

品牌：德國MB

1. 適用范圍

被支原體污染的珍貴細胞、不易獲得的生物樣本或病毒收獲液（特別是不能長(cháng)期培養的樣品）。

2. 用法：

（1）對于貼壁細胞：

步驟1. 培養皿中加入200μl Mynox®和 2.8ml培養基中（FBS≤5%），混勻。

步驟2. 再加入2ml細胞（細胞數為104~105，培養基中的FBS需≤5%）。

步驟3. 細胞培養2小時(shí)，棄上清，換用新鮮培養基培養4代即可。

（2）對于懸浮細胞：

步驟1. 在離心管中加入200μl Mynox®和1.6ml胰酶（0.125 %，5 mM EDTA in PBS），混勻。

步驟2. 加入1.6ml細胞（細胞數為104~105）。

步驟3. 室溫靜置30min。

步驟4. 600×g離心5min。棄上清，換用新鮮培養基培養4代即可。