一篇發(fā)表在雜志Nature Genetics上的研究報告中,來(lái)自意大利、英國和美國的科學(xué)家們通過(guò)研究分離了一群免疫細胞相關(guān)的基因突變,其或會(huì )影響機體患自身免疫性疾病的風(fēng)險,文章中,研究人員詳細描述了這種用來(lái)揭示前所未知的免疫細胞突變的技術(shù)和工具,這些突變與多種人類(lèi)免疫相關(guān)疾病直接相關(guān)。
此前研究結果表明,許多曾經(jīng)被認為是器官特異性或位點(diǎn)特異性的疾病或與機體的免疫狀況有關(guān),而炎性疾病、多發(fā)性硬化癥和川崎病只是幾個(gè)例子而異,作為對這些研究發(fā)現的回應,近年來(lái),科學(xué)家們一直在深入研究相關(guān)的免疫細胞及可能導致這些疾病發(fā)生的相關(guān)變異。
這項研究中,研究人員對來(lái)自意大利撒丁區的3500名參與者機體的血液樣本進(jìn)行了全基因組關(guān)聯(lián)性研究,他們利用基因分型譜技術(shù)和歸因分析技術(shù)作為一種手段來(lái)尋找涉及731種免疫細胞特性的突變,實(shí)際的工作包括使用細胞表面標記物和基于流式細胞術(shù)的細胞分選手段。
總而言之,研究人員分析了血液樣本中大約2200萬(wàn)個(gè)突變的數據,其中一些來(lái)自于同一家族的個(gè)體,在此過(guò)程中,研究者還發(fā)現了122個(gè)單核苷酸多態(tài)性,其中52個(gè)是新的特征,17個(gè)基因位點(diǎn)獨立地與459個(gè)單一的細胞特性有關(guān),研究者指出,這些多態(tài)性中還包括大約36個(gè)與已知自身免疫性疾病相關(guān)的基因位點(diǎn)的突變。
隨后研究者還進(jìn)行了精細化繪圖、后續驗證、選擇性分析、表達和定量特征位點(diǎn)的分析來(lái)更好地了解其所分離出來(lái)的特性之間的關(guān)聯(lián)性,而更重要的是,他們還想觀(guān)察是否能發(fā)現與自身免疫性疾病發(fā)生相關(guān)的未知關(guān)聯(lián),下一步研究者將會(huì )利用蛋白定量特征位點(diǎn)技術(shù)來(lái)調查是否存在這種關(guān)聯(lián),以幫助發(fā)現與已經(jīng)使用的藥物之間的任何關(guān)聯(lián),并闡明這些藥物是否還能用于治療其它病癥,未來(lái),在基于免疫細胞亞型和相關(guān)疾病治療的研究過(guò)程中,針對不止一種通路或蛋白質(zhì)進(jìn)行靶向性研究或許是未來(lái)研究的一個(gè)大方向。
生命科學(xué)實(shí)驗中,離不開(kāi)胎牛血清,胎牛血清 在細胞培養中的作用:
1. 提供對維持細胞指數生長(cháng)的激素,基礎培養基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養物,以及主要的低分子營(yíng)養物。
2. 提供結合蛋白,能識別維生素、脂類(lèi)、金屬和其他激素等,能結合或調節它們所結合的物質(zhì)活力。
3. 有些情況下結合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結合,起到解毒作用。
4. 是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質(zhì)上所需因子來(lái)源。
5. 起酸堿度緩沖液作用。
6. 提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
7. 參與細胞凍存。
在細胞培養中,胎牛血清加入基礎培養基的濃度大多為5%~20%(常見(jiàn)為10%)的。具體到不同試驗,應依據文獻報導,或細胞類(lèi)型或基礎培養基的成分來(lái)確定濃度。
胎牛血清應在-20℃儲存,運輸應干冰冷鏈運輸,避免反復凍融,確保血清中因子活性不受影響,保證血清優(yōu)良品質(zhì)。