人們之前認為只有真菌DNA發(fā)生的突變才會(huì )導致對抗真菌藥物產(chǎn)生抗藥性。目前的診斷技術(shù)依賴(lài)于對真菌DNA進(jìn)行測序來(lái)尋找這樣的突變。

在一項新的研究中，來(lái)自英國愛(ài)丁堡大學(xué)的研究人員發(fā)現真菌可以在不改變它們的DNA---它們的遺傳密碼---的情形下產(chǎn)生抗藥性。相關(guān)研究結果發(fā)表在2020年9月17日的Nature期刊上，論文標題為“Epigenetic gene silencing by heterochromatin primes fungal resistance”。

 

這項新的研究發(fā)現，真菌可以在沒(méi)有基因變化的情況下出現抗藥性。相反，真菌表現出表觀(guān)遺傳變化---不影響它們的DNA的變化，這表明真菌抗藥性的許多原因可能在以前被忽略了。

每年真菌疾病影響十億人，據估計造成160萬(wàn)人死亡?？顾幮哉婢腥臼且粋€(gè)日益嚴重的問(wèn)題，特別是在免疫系統較弱的患者中，如HIV感染者。目前有效的抗真菌藥物很少。

過(guò)度使用農業(yè)殺真菌劑也導致土壤傳播的真菌的抗藥性增加。真菌疾病每年導致世界上多達三分之一的糧食作物損失。

在這項新的研究中，這些研究人員通過(guò)使用模擬抗真菌藥物活性的caffeine處理一種稱(chēng)為裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe）的酵母菌，觀(guān)察到這種酵母菌出現抗藥性。他們發(fā)現由此產(chǎn)生的抗藥性酵母菌在影響它們的DNA組裝方式的特殊化學(xué)標簽上發(fā)生了改變。一些基因被包裝在稱(chēng)為異染色質(zhì)的結構中，它使得基因沉默或失活，換言之，這種表觀(guān)遺傳變化導致這種酵母菌產(chǎn)生抗藥性。

這一發(fā)現可能為通過(guò)改進(jìn)現有的表觀(guān)遺傳藥物或開(kāi)發(fā)干擾真菌異染色質(zhì)的新藥物來(lái)治療耐藥性真菌感染鋪平道路。

改進(jìn)的殺菌劑處理糧食作物可以限制農業(yè)損失，也可以減少環(huán)境中持續加劇人類(lèi)感染的抗藥性真菌菌株的數量。

論文通訊作者、愛(ài)丁堡大學(xué)生物科學(xué)學(xué)院細胞生物學(xué)研究所惠康細胞生物學(xué)中心的Robin Allshire教授說(shuō)，“這些發(fā)現可能對理解植物、動(dòng)物和人類(lèi)真菌病原體如何對非常有限的有效抗真菌藥物治療產(chǎn)生抗藥性產(chǎn)生影響，我們的團隊對此感到興奮。”

支原體是細胞外生存的小微生物，是一類(lèi)缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在0.2~0.5um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲形、分枝狀等多種態(tài)。

1、支原體存在于我們周?chē)?，他可能就如塵埃一樣存在于我們的環(huán)境中

2、可透過(guò)一般的濾膜，所以不要寄希望于過(guò)濾可以清楚支原體污染的液體

支原體對培養細胞的污染發(fā)生率高，據估計平均發(fā)生率在60%左右。同時(shí)又非常隱秘，早期不容易被發(fā)現，除非用特異性和靈敏度都非常高的檢測試劑盒。支原體因為個(gè)頭小，能穿過(guò)0.22微米濾器，并且在實(shí)驗室內會(huì )潛在的擴散。支原體污染使得用被污染的細胞樣本做的實(shí)驗*失去意義和價(jià)值。

那我們在做細胞培養時(shí)如何檢測支原體呢？

 

1. 支原體常規PCR檢測試劑盒（一步法）

用途說(shuō)明：

1）適合科研單位檢測，或單位內檢，用PCR法檢測細胞或其他生物基質(zhì)。

2) 比藥典操作標準合并了一步，（將內控對照試劑預先混合在PCR mix試劑中），操作更簡(jiǎn)潔。

3)樣本量為2μl，靈敏度為20個(gè)基因組拷貝/反應。結果準確。

2. 支原體常規PCR檢測試劑盒（經(jīng)典法，不含Taq酶）

用途說(shuō)明：

1) 符合歐洲藥典、中國藥典要求，更適合細胞治療，CAR-T，抗體藥、疫苗等臨床項目申報和質(zhì)檢。

2）樣本需先做DNA抽提。抽提后樣本加入量為10μl。

3）試劑盒中不含Taq酶，需另外購買(mǎi)。

4) 廠(chǎng)家可協(xié)助完善方法驗證步驟。

3. 支原體常規PCR檢測試劑盒（經(jīng)典法，含Taq酶）

用途說(shuō)明：

1) 符合歐洲藥典、中國藥典要求，更適合細胞治療，CAR-T，抗體藥、疫苗等臨床項目申報和質(zhì)檢。

2）樣本需先做DNA抽提。抽提后樣本加入量為10μl。

3）試劑盒中含Taq酶，無(wú)需另外購買(mǎi)。

4) 廠(chǎng)家可協(xié)助完善方法驗證步驟。

4. 支原體常規PCR檢測試劑盒（預分裝法）

用途說(shuō)明：

1）適合科研單位檢測，或單位內檢，用PCR法檢測細胞或其他生物基質(zhì)。

2) 比一步法更為方便。表現在：

① PCR組分（包括酶、核苷酸、引物、內控對照，均為凍干粉）和上樣緩沖液/染料已預先分裝在八連管中。

② PCR結束后，產(chǎn)物直接上膠，不需再加上樣緩沖液和染料。

3)價(jià)格比一步法略高。適合想節省時(shí)間、追求簡(jiǎn)易的用戶(hù)。