如何正確試用胎牛血清

【胎牛血清】是細胞培養中重要的天然培養基。

它是采自5-8個(gè)月胎齡牛胚胎中的胎血。此時(shí)胎牛各臟器正處生長(cháng)分化階段，血中含有豐富的生長(cháng)發(fā)育因子，非常適合各種細胞的培養。

因此，如何在使用過(guò)程中保護這些因子的活性，達到大的細胞培養效果，就需要正確地使用胎牛血清。

正確地使用胎牛血清可分為以下四個(gè)方面：

1. 正確儲存，避免反復凍融

1) 血清在-20°C凍存。

2) 血清避免反復凍融，以免降低因子活性。如一次用不完，應進(jìn)行分裝。

3) 血清和培養基應盡可能“現用現配”，配好的培養液，應于一周內用完。

4) 血清避免在4°C或更高溫度靜置過(guò)久，否則會(huì )破壞血清中有效活性成分，影響血清品質(zhì)。

 

2. 正確的融化

上流行的【血清融化三步法】可大限度地保存血清中因子的活性，不會(huì )產(chǎn)生沉淀，同時(shí)能縮短血清融化時(shí)間。具體如下：

 

 

3. 關(guān)于胎牛血清的滅活

真正的胎牛血清因為胎牛沒(méi)有形成有效補體，如果針對補體滅活的話(huà)，就不需要。其他情況根據實(shí)驗設計來(lái)決定。

4. 胎牛血清的濃度

胎牛血清通常是以2%～20%的比例加到基礎培養基中，混合后配成*培養基。

曾有文獻報道，不同胎牛血清濃度對細胞存在一定的影響，尤其是干細胞和原代細胞。具體濃度需要用戶(hù)根據自己的實(shí)驗來(lái)確定，以既保證培養的效果，又避免血清的浪費。

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