400-166-8600
生物鐘作為機體的的生物計時(shí)系統，負責將哺乳動(dòng)物的生理和行為周期與外界的晝夜節律同步，從而維持機體穩態(tài)。干細胞老化是機體衰老和退行性疾病的重要標志。
近年來(lái)的研究表明，生物鐘與衰老過(guò)程密切相關(guān)。但是，衰老是如何影響生物鐘？核心節律蛋白又是如何調節衰老過(guò)程？這些問(wèn)題仍尚不明確。
2020年7月31日，中國科學(xué)院動(dòng)物研究所和中國科學(xué)院北京基因組研究所的團隊在 《Cell Research 》在線(xiàn)發(fā)表題為 Stabilization of heterochromatin by CLOCK promotes stem cell rejuvenation and cartilage regeneration 的研究論文。研究發(fā)現，核心節律蛋白 CLOCK 可延緩干細胞衰老并促進(jìn)關(guān)節軟骨再生。
DOI: 10.1038 / s41422-020-0385-7
CLOCK是哺乳動(dòng)物生物鐘的核心組成成分，可調節生物鐘相關(guān)基因的轉錄。CLOCK單核苷酸多態(tài)性與肥胖、糖尿病、阿爾茨海默病等有關(guān)。既往研究表明，CLOCK敲除小鼠壽命縮短，并伴有白內障、皮炎等衰老相關(guān)疾病的發(fā)生。然而，CLOCK調節衰老的具體分子機制和靶點(diǎn)尚不明確。
研究人員發(fā)現，在老化的人類(lèi)間充質(zhì)干細胞（hMSC）中，CLOCK的表達降低，提示CLOCK可能參與調節hMSC衰老過(guò)程。此外， CLOCK缺陷的hMSC中晝夜節律激活受損，并出現加速衰老的表型；將CLOCK重新回輸到CLOCK缺陷的 hMSC中，可以恢復其晝夜節律異常，逆轉hMSC衰老。
CLOCK缺陷的hMSCs呈現出加速衰老的表型
隨后，研究人員利用HEK293T細胞研究CLOCK缺失加速hMSC衰老的分子機制。有趣的是，在CLOCK蛋白復合物中發(fā)現了異染色質(zhì)相關(guān)蛋白KAP1。免疫共沉淀實(shí)驗證實(shí)了HEK293T細胞和hMSCs中CLOCK與異染色質(zhì)相關(guān)蛋白之間存在相互作用。近一步的研究表明，CLOCK是hMSC的異染色質(zhì)穩定劑，通過(guò)與核膜和異染色質(zhì)相互作用來(lái)調節hMSC的衰老。
CLOCK與核纖層蛋白和異染色質(zhì)相關(guān)蛋白KAP1形成復合物
后，研究人員發(fā)現，在老齡化小鼠關(guān)節中CLOCK表達降低。將編碼CLOCK的慢病毒注射到小鼠的膝關(guān)節腔中，可降低膝關(guān)節中衰老細胞的比例，緩解與衰老相關(guān)的關(guān)節炎癥并刺激軟骨發(fā)育，終改善運動(dòng)能力。
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來(lái)源：生物探索
胎牛血清，是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物，含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(cháng)因子、激素、無(wú)機物等，其組成成份大部分已知，但還有一部分尚不清楚，這些物質(zhì)對促進(jìn)細胞生長(cháng)或抑制生長(cháng)活性是達到生理平衡的。其中不含細胞、纖維蛋白和凝血因子。
胎牛血清 在細胞培養中的作用：
1. 提供對維持細胞指數生長(cháng)的激素，基礎培養基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養物，以及主要的低分子營(yíng)養物。
2. 提供結合蛋白，能識別維生素、脂類(lèi)、金屬和其他激素等，能結合或調節它們所結合的物質(zhì)活力。
3. 有些情況下結合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結合，起到解毒作用。
4. 是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質(zhì)上所需因子來(lái)源。
5. 起酸堿度緩沖液作用。
6. 提供蛋白酶抑制劑，使在細胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活，保護細胞不受傷害。
7. 參與細胞凍存。
在細胞培養中，胎牛血清加入基礎培養基的濃度大多為5%～20%（常見(jiàn)為10%）的。具體到不同試驗，應依據文獻報導，或細胞類(lèi)型或基礎培養基的成分來(lái)確定濃度。
胎牛血清應在-20℃儲存，運輸應干冰冷鏈運輸，避免反復凍融，確保血清中因子活性不受影響，保證血清優(yōu)良品質(zhì)。
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