優(yōu)質(zhì)的新生牛血清可以很好的培養干細胞

新生牛血清被廣泛應用于疫苗產(chǎn)品等大量生產(chǎn)生物制品領(lǐng)域，而培養干細胞大部分實(shí)驗室仍采用品質(zhì)更高的胎牛血清，其實(shí)在培養腸道干細胞已經(jīng)有實(shí)驗室采用新生牛血清嘗試培養，下面我們來(lái)看看相關(guān)實(shí)驗結果。

 

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腸道干細胞位于腸隱窩內，在維持腸道屏障結構和功能完整方面扮演著(zhù)重要角色。用體外培養技術(shù)對腸干細胞進(jìn)行原代培養，以進(jìn)一步了解其增殖分化機制，這對治療腸道相關(guān)疾病具有重要意義。而血清品質(zhì)和濃度對原代細胞貼壁和生長(cháng)則具有相當大的影響。有人曾嘗試采用DMEM加新生牛血清或胎牛血清進(jìn)行腸道干細胞的原代培養。嘗試的血清濃度分別為 5%、10%、15%及 20%，并且還加入表皮生長(cháng)因子20ng/ml、胰島素2 g/ml、谷氨酰胺 2 mmol/ml、青霉素及鏈霉素各 100 U/ml。腸干細胞的鑒定則采用用角蛋白18抗體（腸干細胞為陽(yáng)性）以及波形蛋白抗體（腸干細胞為陰性，間質(zhì)細胞為陽(yáng)性）進(jìn)行組化染色和鑒定。

作者對胚胎鼠腸組織進(jìn)行的腸干細胞的分離和培養。結果顯示，只有采用10%新生牛血清加DMEM的培養方式效果很好，在培養24～48h后，貼壁生長(cháng)的細胞絕大部分為上皮細胞，上皮樣細胞呈集落狀生長(cháng)，這與國外報道的細胞形

態(tài)基本符合，其雜質(zhì)細胞卻很少見(jiàn)到。而其他血清加DMEM的培養則鏡下顯示，細胞含有大量呈梭狀的間質(zhì)細胞，上皮細胞所占比例不足 5%。由上可見(jiàn)，采

用含10%新生牛血清的細胞培養基進(jìn)行腸干細胞群的構建可以獲得較為純化的腸干細胞群，角蛋白18染色陽(yáng)性，波形蛋白染色陰性。因此，選擇合適的血清質(zhì)量和濃度對干細胞的培養有著(zhù)十分重要的意義。