細胞培養中常用血清種類(lèi)有哪些？

熟悉細胞實(shí)驗的小伙伴，對動(dòng)物血清應該不陌生吧？

血清，指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后，分離出的淡黃色透明液體（理論上）或指纖維蛋白原已被除去的血漿。

其主要作用是提供基本營(yíng)養物質(zhì)、激素和各種生長(cháng)因子、結合蛋白、促接觸和生長(cháng)因子，使細胞貼壁免受機械損傷、對培養中的細胞起到某些保護作用。

其實(shí)，細胞培養從上個(gè)世紀開(kāi)始發(fā)展至今，經(jīng)歷了多個(gè)階段：

1885年Roux生理鹽水培育雞胚組織；

1903-1906年Jolly和Beebe等發(fā)明了懸滴培養；

1907年Harrison培養蛙胚神經(jīng)成功；

1910、1912年Carrel

完善了懸滴培養法；

1923年Carral設計創(chuàng )立了卡氏瓶培養法；

隨后培養器具不斷推陳出新，

塑料瓶、皿、多孔培養板的使用逐漸普遍。

在培養基方面

也經(jīng)歷了巨大變革，

天然培養基?合成培養基

雞胚浸出液?動(dòng)物血清

直至60年代出現無(wú)血清培養基。

而動(dòng)物血清的種類(lèi)，

也愈加豐富：

牛血清、馬血清、豬血清，

還有兔、雞等動(dòng)物的血清，

都有它們的用武之地。

動(dòng)物不同，分離出的血清也會(huì )有所不同。物種來(lái)源相同的血清，根據采血時(shí)間、血源品質(zhì)也會(huì )分出不同的類(lèi)別。有些時(shí)候，根據實(shí)驗需求，還要對血清進(jìn)行一些特殊的加工，因此，市面上的血清種類(lèi)就變得五花八門(mén)了。

所以今天就來(lái)給大家簡(jiǎn)單介紹一下，常見(jiàn)的細胞學(xué)動(dòng)物血清有哪些，各自有什么特點(diǎn)，Let's go！

01

牛血清

牛來(lái)源的血清，可以細分為很多種：

根據采血時(shí)間分

合格的血清產(chǎn)品，需要嚴格控制采血時(shí)間點(diǎn)，才能保證最基本的血清質(zhì)量。以胎牛血清為例：

一旦牛胎齡過(guò)長(cháng)，會(huì )導致補體系統逐漸發(fā)育*，進(jìn)而使制備的血清中含有補體，影響血清品質(zhì)。另外，胎牛中各類(lèi)生長(cháng)因子也會(huì )隨著(zhù)生長(cháng)發(fā)育而逐漸喪失，進(jìn)一步使血清品質(zhì)下降。

實(shí)驗不是千篇一律的，根據不同的需求，有時(shí)候需要對血清進(jìn)行一些“定制化處理"。

根據不同品質(zhì)分

根據內毒素含量不同，血清可以分為不同品質(zhì)：

當血清中內毒素含量≤10EU/ml時(shí)，此血清為特級胎牛血清；

當血清中內毒素含量﹥10EU/ml，≤ 25EU/ml時(shí)，此血清為優(yōu)級胎牛血清；

當血清中內毒素含量≥ 25EU/ml時(shí)，此血清為標準級胎牛血清；

根據不同處理分

透析胎牛血清：透析過(guò)濾去除10000D以下小分子（如次huang嘌呤和胸腺核苷），避免外源小分子對細胞產(chǎn)生干擾。適合脈沖示蹤實(shí)驗（例如同位素標記特定小分子，并加入到培養體系中，以研究細胞代謝），也適合轉染CHO后的篩選等應用。

去外泌體血清：通過(guò)超速離心法去除絕大部分外泌體的血清，適用于外泌體相關(guān)細胞實(shí)驗研究。

超低lgG的血清：使用親和層析等工藝，去除IgG，使其水平低于要求值，可用于抗體、病毒和病毒反應以及細胞表面抗原表位相關(guān)研究。

活性炭/葡聚糖處理的血清：可降低血清中類(lèi)固醇激素的濃度，例如雌二醇、孕酮、皮質(zhì)醇、睪酮、T3 和 T4。適用于相關(guān)激素研究的實(shí)驗。

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02

馬血清

馬血清一般分為兩種：

第一種馬血清含有的大分子蛋白比較多，適用于蛋白封閉；

第二種馬血清為細胞培養級別。它經(jīng)過(guò)多次過(guò)濾，祛除了許多大分子蛋白，但保留了血清中促細胞生長(cháng)的活性因子，因而能用于細胞培養，例如神經(jīng)細胞培養時(shí)，培養基中則需要添加馬血清。

優(yōu)質(zhì)的馬血清來(lái)自健康馬血液，為封閉系統內無(wú)菌采血過(guò)濾而成，為淡黃色澄清液體，超低內毒素，無(wú)溶血，無(wú)異物，無(wú)細菌、真菌、支原體、噬菌體等。

03

豬血清

豬血清，常用于豬肺炎支原體疫苗的生產(chǎn)。

在對細胞和活疫苗進(jìn)行支原體檢驗中，《獸藥典》也明確推薦了豬血清作為支原體檢驗用液體培養基的組成成分。

并且，《獸藥典》指出在【豬支原體肺炎微量間接血凝試驗】和【豬支氣管敗血波氏桿菌凝集試驗】中需要陰性血清，即優(yōu)質(zhì)的豬血清，血源必然來(lái)自健康動(dòng)物。

1989年左右，也有國外學(xué)者建議用豬血清取代牛血清，用于培養制造非洲豬瘟病毒的細胞（見(jiàn)《動(dòng)物檢疫》 1991年01期《豬血清中的牛血清白蛋白抗體引起非洲豬瘟血清學(xué)診斷的假陽(yáng)性反應》），原因是牛血清中的白蛋白會(huì )干擾非洲豬瘟抗體的檢測，造成假陽(yáng)性反應。

04

其他動(dòng)物源血清

兔血清：

兔血清通常從六個(gè)月或更小的動(dòng)物身上收集，可用于與 BSA 結合用作免疫細胞化學(xué)[1]和免疫組織化學(xué)中的封閉血清[2]。

山羊血清：

多用做封閉液，也有一些研究人員發(fā)現，優(yōu)質(zhì)的山羊血清可用于某些細胞的培養[3][4]。

雞血清：

從屠宰供人類(lèi)食用的健康雞中收集的。有研究用于血清維生素 B12 的放射性同位素稀釋測定[5]。