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細胞培養可否使用不同的培養基?

更新時(shí)間:2022-09-29  |  點(diǎn)擊率:532

對于購買(mǎi)的商品化細胞來(lái)說(shuō),產(chǎn)品目錄或者細胞說(shuō)明書(shū)上所推薦的培養基,一般是細胞株的原始提供者推薦的培養基,或者是經(jīng)過(guò)驗證的最利于該細胞株生活的培養基。其他培養基存在一定培養風(fēng)險。因此,應謹慎更換培養基,一定要更換,推薦實(shí)驗前預先保留一份細胞種。

更換培養基有兩種方法:

1、直接更換,強制使細胞適應新的培養基;

2、還有一種更溫和的方法,傳代細胞的時(shí)候,將新培養基與原推薦使用的培養基1:1混合,并另外分出一板細胞,用原先推薦的培養基。傳代后仔細觀(guān)察細胞的生長(cháng)狀態(tài),如果混合培養基培養的細胞生長(cháng)狀態(tài)不好,應立即停止更換培養基。若生長(cháng)狀態(tài)好,可以繼續傳代分瓶,一板保留原推薦培養基,另外一板新培養基與原推薦使用的培養基3:1混合,繼續觀(guān)察,如果細胞狀態(tài)好,可以全部換成新鮮的培養基。

如何挑選胎牛血清?

細胞要養好,需要選擇品質(zhì)優(yōu)異的血清,如Ausbian®進(jìn)口特級胎牛血清,它適合各種細胞培養,尤其適合難養細胞,如:干細胞、肝細胞,神經(jīng)細胞,原代培養、細胞融合、轉染細胞等。

WHO公布的《用動(dòng)物細胞體外培養生產(chǎn)生物制品規程》中的要求:

1、牛血清必須來(lái)自有文件證明無(wú)牛海綿狀腦病的牛群或國家,并應具備適當的監測系統。

2、有些國家還要求牛血清來(lái)自未用過(guò)反芻動(dòng)物蛋白飼料的牛群。

3、證明所用牛血清中不含對所生產(chǎn)疫苗病毒的抑制物。

4、血清要通過(guò)濾膜過(guò)濾除菌,保證無(wú)菌。

5、無(wú)細菌、霉菌、支原體和病毒的污染,有些國家要求無(wú)細菌噬菌體污染。

6、對細胞有良好的支持繁殖作用。

我國對牛血清的質(zhì)量中提出比較嚴格的標準要求:

包括蛋白質(zhì)含量,細菌、真菌、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細菌內毒素,支持細胞增殖檢查。一款來(lái)自澳洲的Ausbian®胎牛血清在市場(chǎng)上頗受歡迎。它具有精選內毒素極低、產(chǎn)量充足的血清批次,滿(mǎn)足干細胞、基因敲除、原代培養、細胞典藏、長(cháng)期傳代等各類(lèi)細胞的培養要求;澳洲血源,完整的檢測報告及滅病毒服務(wù),為各類(lèi)臨床相關(guān)項目的申報提供完整支持等特點(diǎn)。


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