細胞株的污染鑒定、預防和處理問(wèn)題

普通微生物污染：培養基渾濁，高倍鏡觀(guān)察有微生物污染；按規定棄用并全面嚴格滅菌。

支原體污染：顯微鏡很難直接觀(guān)察，細胞通常表現為細胞生長(cháng)緩慢，有細胞漂浮等等，可通過(guò)MB Venor®Gem qEP試劑盒，進(jìn)行支原體檢測。如發(fā)現支原體污染，應按規定棄用，實(shí)驗室要及時(shí)全面消毒滅菌，防止蔓延，推薦使用MB Mycoplasma-off™對細胞培養環(huán)境進(jìn)行清理 ，使用Water Shield™對水槽進(jìn)行清潔、預防處理。如果細胞株珍貴，可用MB相關(guān)支原體祛除試劑Mynox®、Mynox® Gold、Zell Shield®對細胞進(jìn)行處理。

如何挑選胎牛血清？

細胞要養好，需要選擇品質(zhì)優(yōu)異的血清，如Ausbian®進(jìn)口特級胎牛血清，它適合各種細胞培養，尤其適合難養細胞，如：干細胞、肝細胞，神經(jīng)細胞，原代培養、細胞融合、轉染細胞等。

WHO公布的《用動(dòng)物細胞體外培養生產(chǎn)生物制品規程》中的要求：

1、牛血清必須來(lái)自有文件證明無(wú)牛海綿狀腦病的牛群或國家，并應具備適當的監測系統。

2、有些國家還要求牛血清來(lái)自未用過(guò)反芻動(dòng)物蛋白飼料的牛群。

3、證明所用牛血清中不含對所生產(chǎn)疫苗病毒的抑制物。

4、血清要通過(guò)濾膜過(guò)濾除菌，保證無(wú)菌。

5、無(wú)細菌、霉菌、支原體和病毒的污染，有些國家要求無(wú)細菌噬菌體污染。

6、對細胞有良好的支持繁殖作用。

我國對牛血清的質(zhì)量中提出比較嚴格的標準要求：

包括蛋白質(zhì)含量，細菌、真菌、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細菌內毒素，支持細胞增殖檢查。一款來(lái)自澳洲的Ausbian®胎牛血清在市場(chǎng)上頗受歡迎。它具有精選內毒素極低、產(chǎn)量充足的血清批次，滿(mǎn)足干細胞、基因敲除、原代培養、細胞典藏、長(cháng)期傳代等各類(lèi)細胞的培養要求；澳洲血源，完整的檢測報告及滅病毒服務(wù)，為各類(lèi)臨床相關(guān)項目的申報提供完整支持等特點(diǎn)。