一文解析「細胞質(zhì)空泡化」，這幾個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)需注意

細胞空泡化也叫做細胞質(zhì)空泡化，是2019年公布的感染病學(xué)名詞。

具體表現為：變性細胞的胞質(zhì)、胞核內出現大小不一的空泡(水泡)，細胞呈蜂窩狀或網(wǎng)狀的現象。變性嚴重者，小水泡相互融合成大水泡，細胞核懸于中央，或被擠于一側，細胞形體顯著(zhù)腫大，胞質(zhì)空白，外形如氣球狀。

導致細胞質(zhì)空泡化的潛在因素

有一部分細胞質(zhì)空泡化可以是可逆的，這類(lèi)型的空泡化一般存在于暴露在誘導劑的情況下。誘導劑引起細胞狀態(tài)的改變或者細胞周期停滯，表現為細胞質(zhì)空泡化。合理控制誘導劑使用范圍，在脫離誘導劑后，細胞通常會(huì )回復正常表型。

也有一部分細胞質(zhì)空泡化是不可逆的。這種情況下，一般會(huì )導致細胞死亡，許多外源化合物、細菌、病毒感染后均會(huì )出現不可逆的胞質(zhì)空泡化。

因此，導致細胞質(zhì)空泡化的常見(jiàn)因素，可以總結為以下幾點(diǎn)（如有更多觀(guān)點(diǎn)，歡迎評論區補充）：

藥物誘導

一些特定的誘導劑處理，是細胞質(zhì)空泡化的原因，一般是需要觀(guān)察細胞變化而對細胞進(jìn)行的特殊處理。

細胞老化

原代細胞培養的過(guò)程中有時(shí)會(huì )出現此類(lèi)情況。一些細胞處于終末分化狀態(tài)，不會(huì )再分裂，時(shí)間長(cháng)了就會(huì )空泡化而死亡。

對于永生化的細胞系進(jìn)行反復傳代，導致細胞嚴重老化，也會(huì )出現這一現象。

滲透壓和pH值

在細胞培養過(guò)程中，如果培養基滲透壓或pH發(fā)生比較大的改變，或培養基的初始pH值與細胞正常所需pH值差別巨大，也容易使細胞生長(cháng)收到刺激，發(fā)生空泡化。

胰酶消化

胰酶消化時(shí)間過(guò)長(cháng)，或是在吹打細胞時(shí)太過(guò)大力而產(chǎn)生太多氣泡，都容易導致細胞狀態(tài)受損，長(cháng)期如此，可能引起細胞質(zhì)空泡化。

細胞代謝

在細胞培養過(guò)程中，由于血清質(zhì)量差或是濃度過(guò)低等情況下，可能導致細胞代謝出現問(wèn)題，如內質(zhì)網(wǎng)應激從而引起細胞質(zhì)空泡化的現象。

細胞自噬

當細胞缺乏營(yíng)養處于饑餓狀態(tài)時(shí)，也容易因細胞自噬而產(chǎn)生空泡，形成自噬小體，但是自噬小體僅能在電鏡下觀(guān)察到，光學(xué)顯微鏡下是觀(guān)察不到的。

細胞污染

支原體污染：支原體污染的初期，細胞是沒(méi)有什么明顯癥狀的，而且也無(wú)法通過(guò)光學(xué)顯微鏡觀(guān)察到，只有在嚴重的時(shí)候會(huì )導致細胞狀態(tài)變差，出現細胞空泡化的現象，細胞膜上也會(huì )出現小黑點(diǎn)附著(zhù)，以及培養基變色速度加快這類(lèi)癥狀。

病毒污染：一些文獻上也有記錄，觀(guān)察到病毒污染也會(huì )導致細胞出現空泡化的情況。

細胞質(zhì)空泡化怎么辦？

由于導致細胞質(zhì)空泡的原因眾多，因此要仔細分析，尋找解決方案。

1）如果是因為細胞老化導致的，可以通過(guò)復蘇代數靠前的細胞進(jìn)行培養來(lái)解決細胞空泡問(wèn)題。

2）調整培養基至合適的pH，再進(jìn)行培養，來(lái)解決因pH差異大而導致的細胞空泡問(wèn)題。

3）在傳代時(shí)，選擇科學(xué)的消化方法：合適的胰酶濃度、適當的消化市場(chǎng)，在操作時(shí)避免吹打太過(guò)用力出現太多氣泡。

4）要保證細胞培養所需的營(yíng)養充足，可以根據情況，適當增加血清濃度以及谷氨酰胺。

5）選擇質(zhì)量?jì)?yōu)質(zhì)、渠道正規的胎牛血清，優(yōu)質(zhì)胎牛血清經(jīng)過(guò)嚴格的質(zhì)量檢測，外源物質(zhì)盡可能做到更低，減少對細胞的刺激；渠道正規的胎牛血清，全程冷鏈運輸，避免反復凍融而帶來(lái)的營(yíng)養物質(zhì)的損耗，細胞生長(cháng)更安心。

Ausbian進(jìn)口特級胎牛血清， 精選內毒素更低的批次（≤3EU/ml），微生物檢測結果均為未檢出，全程冷鏈運輸，避免反復凍融。

6）在細胞培養時(shí)要嚴格進(jìn)行無(wú)菌操作，操作時(shí)要規范，減少污染的可能性。對于實(shí)驗環(huán)境與器械，可以用實(shí)驗環(huán)境專(zhuān)用的污染清除試劑：Mycoplasma-off™、Water Shield™，有效預防實(shí)驗環(huán)境中的支原體污染。