常見(jiàn)的細胞培養物污染主要分為化學(xué)污染與生物污染。
生物污染
細菌污染:
在生物污染中,細菌污染更為常見(jiàn)。特點(diǎn)就是:發(fā)生迅速、容易觀(guān)察。一般發(fā)生細菌污染后幾天內,就能肉眼觀(guān)察到;可肉眼觀(guān)察到培養物變渾濁,有時(shí)可觀(guān)察到明顯顆粒物,液體表面可能會(huì )形成一層薄膜。
真菌污染:
酵母菌、霉菌是真菌污染中常見(jiàn)的兩類(lèi)。污染初期,培養基pH均不會(huì )有明顯變化,后期會(huì )伴隨pH的升高,培養物會(huì )變得混濁,顯微鏡下觀(guān)察,酵母菌污染會(huì )有橢球形或球形顆粒,而霉菌污染則能看到明顯菌絲。
支原體污染:
支原體非常小,光學(xué)顯微鏡下難以檢測,污染前期也很難看到明顯現象。當支原體密度高到一定程度后,會(huì )導致細胞培養物“變質(zhì)":pH驟變引起培養基快速變黃等。一些生長(cháng)緩慢的支原體可在培養物中持續存活,而不會(huì )導致細胞死亡,但支原體污染的細胞,通常行為和代謝都會(huì )發(fā)生改變,進(jìn)而影響實(shí)驗結果。
病毒污染:
病毒可以利用宿主細胞的結構進(jìn)行繁殖。體積小,檢測及祛除的難度都比較大。雖然大多數病毒對宿主的要求都比較嚴格,通常不會(huì )對宿主以外物種及細胞培養物產(chǎn)生不良影響,但對被病毒感染的細胞本身會(huì )產(chǎn)生比較大的威脅。因此,實(shí)驗時(shí),要選擇來(lái)源正規的細胞株,實(shí)驗操作過(guò)程中,也要注意無(wú)菌操作,預防污染。
細胞交叉污染
不同細胞共同培養在一個(gè)培養皿內,就會(huì )形成交叉污染。需要通過(guò)合格的細胞購買(mǎi)渠道,以及嚴格規范的操作流程規避該問(wèn)題。
化學(xué)污染
一些外源化學(xué)物質(zhì),如:用過(guò)的器具未清洗干凈,使用的添加劑純度不達標等等。都會(huì )對細胞產(chǎn)生或大或小的影響,此類(lèi)影響可能抑制細胞生長(cháng),也可能加速細胞生長(cháng),但這些都是不可控的。
因此,在挑選試劑時(shí),要購買(mǎi)在正規產(chǎn)品,盡量使用一次性滅菌器具,注意實(shí)驗操作規范。
創(chuàng )造無(wú)菌培養環(huán)境
細胞一旦發(fā)生污染,多數情況下都不可再繼續使用,即便是使用祛除試劑,也會(huì )造成不可避免的經(jīng)濟成本和時(shí)間成本。
因此,為細胞創(chuàng )造一個(gè)無(wú)菌環(huán)境就顯得尤為重要。對于環(huán)境的清潔、消毒、滅菌,以高效、便捷、安全為基本原則。
日常清潔可選用新捷爾滅這類(lèi)試劑,定期(每周1-2次)對細胞培養室的墻壁、桌面、地面進(jìn)行噴灑、擦拭處理,同時(shí)對細胞培養房間專(zhuān)用的實(shí)驗服等物品進(jìn)行清洗、滅菌處理。
除此之外,推薦使用支原體祛除試劑,對實(shí)驗室環(huán)境進(jìn)行定期維護。
產(chǎn)品特點(diǎn)
(1)快速有效
噴霧劑中含有支原體專(zhuān)用殺除劑Mynox®,可在幾分鐘內迅速殺除支原體。
(2)廣譜抗菌
不僅能祛除支原體,而且能有效祛除葡萄球菌、腸球菌、大腸桿菌、奇異變形桿菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌、牛腹瀉病毒、腺病毒、多瘤病毒、鼠諾如病毒、牛痘病毒、真菌孢子等。
(3)無(wú)腐蝕性和致癌性
乙醇作為溶劑,無(wú)腐蝕性和致癌性成分
(4)操作簡(jiǎn)便
即用型消毒液,可以快速簡(jiǎn)單地保持工作區的清潔干凈