血清使用小技巧 | 如何保證血清活性？解凍和儲存方法很重要

剛到貨的血清應該怎樣儲存？

血清到底要怎樣解凍才能保證活性？

血清在4℃冰箱能放多久？

作為一名細胞培養大戶(hù)，你是不是經(jīng)常會(huì )糾結上面這些問(wèn)題？畢竟血清這種金貴的東西，可得好好珍惜，一個(gè)不小心，就可能導致實(shí)驗失敗，免不了要被導師責備。

那這些問(wèn)題到底應該怎樣解決？有沒(méi)有標準答案？身為一個(gè)資深的代理商，關(guān)于血清的儲存和解凍問(wèn)題我們可是有好好研究過(guò)的。

如果你也存在同樣的疑惑，那就請接著(zhù)往下看吧。

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常規儲存

首先，剛到貨的血清，趁著(zhù)它還凍手，趕緊放進(jìn)-20℃冰箱中，避免反復凍融。當然，如果你的課題組不差錢(qián)，-80℃冰箱空間充足，把血清儲存進(jìn)去也是沒(méi)有問(wèn)題的。

穩了

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如何解凍

很多同學(xué)會(huì )說(shuō)，不就是解凍血清嘛，這題我會(huì )！

放4℃過(guò)夜

emmm……怎么說(shuō)呢，直接在4℃冰箱里過(guò)夜融化的方法，雖然很多人在這么用，但還是有一些潛在的風(fēng)險的。

我們都知道，在血清這種混合物中，融化速度：蛋白質(zhì)等干物質(zhì)>水這類(lèi)溶劑，所以蛋白質(zhì)會(huì )先溶解析出，而水還是結成冰的狀態(tài)，導致瓶子中間會(huì )出現一根透明的冰柱，而周?chē)鷦t會(huì )呈現上黃下紅的分層渾濁液的狀態(tài)，在使用過(guò)程中很容易引起沉淀、混合不均勻、局部濃度過(guò)高等問(wèn)題，影響細胞生長(cháng)。

更重要的一點(diǎn)是，血清中珍貴的生長(cháng)因子等活性物質(zhì)，它們在解凍過(guò)程中，有著(zhù)與細胞復蘇類(lèi)似的經(jīng)歷，都需要快速解凍才能盡可能保留生物活性。顯然，4℃過(guò)夜這樣的長(cháng)時(shí)間處理，很有可能會(huì )導致一部分「營(yíng)養成分」的損失，影響細胞生長(cháng)。

所以，為了更好地保留血清中的活性成分，使細胞培養更穩定，我們推薦使用三步法溶解，具體方法見(jiàn)下表，有需要的同學(xué)可以截圖保存。

如果是儲存在-80℃的血清，則需提前幾天先轉移至-20℃冰箱中（至少24小時(shí)），再使用三步法溶解，避免溫差過(guò)大使血清失活。

注：此方法國際通用，適用于所有培養基，在水浴過(guò)程中，血清的平面要浸在水中。在融化過(guò)程中要慢慢搖動(dòng)瓶身，使血清混勻，但搖動(dòng)中盡量不要產(chǎn)生泡沫！

解凍血清后，可以根據實(shí)驗需求，將其分裝，保證每一份夠一次使用量即可，比如：25ml/管、50ml/管等。密封好后趕緊放回-20℃冰箱繼續儲存。需要配制培養基的時(shí)候，再從-20℃冰箱中取出一管來(lái)解凍使用（盡量能全部配成培養基，不要有剩余），可以有效避免反復凍融的問(wèn)題（遵循現用現配、現配現解凍的原則）。配好的培養基可以放到4℃冰箱進(jìn)行儲存。

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4℃存放時(shí)間

看到這里，問(wèn)題又來(lái)了，配好的培養基，或者剩下的那一點(diǎn)點(diǎn)血清，能在4℃冰箱里放多久呢？

先給出我們認為比較合理的答案，再來(lái)解釋原因：

7天

一般情況下，已經(jīng)解凍的血清，無(wú)論是配成完quan培養基還是在冰箱里備用，都不要超過(guò)一周（7天），原因也很簡(jiǎn)單，存放太久，生長(cháng)因子等物質(zhì)容易失活，而且比較容易受到污染，影響實(shí)驗結果。

不知道今天這期內容有沒(méi)有解決大家的疑惑，無(wú)論是國產(chǎn)還是進(jìn)口血清，都不算便宜，這么貴巴巴的試劑，還請小心使用，物盡其用，可不能讓銀子白花！