剛到貨的血清應該怎樣儲存?
血清到底要怎樣解凍才能保證活性?
血清在4℃冰箱能放多久?
作為一名細胞培養大戶(hù),你是不是經(jīng)常會(huì )糾結上面這些問(wèn)題?畢竟血清這種金貴的東西,可得好好珍惜,一個(gè)不小心,就可能導致實(shí)驗失敗,免不了要被導師責備。
那這些問(wèn)題到底應該怎樣解決?有沒(méi)有標準答案?身為一個(gè)資深的代理商,關(guān)于血清的儲存和解凍問(wèn)題我們可是有好好研究過(guò)的。
如果你也存在同樣的疑惑,那就請接著(zhù)往下看吧。
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常規儲存
首先,剛到貨的血清,趁著(zhù)它還凍手,趕緊放進(jìn)-20℃冰箱中,避免反復凍融。當然,如果你的課題組不差錢(qián),-80℃冰箱空間充足,把血清儲存進(jìn)去也是沒(méi)有問(wèn)題的。
穩了
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如何解凍
很多同學(xué)會(huì )說(shuō),不就是解凍血清嘛,這題我會(huì )!
放4℃過(guò)夜
emmm……怎么說(shuō)呢,直接在4℃冰箱里過(guò)夜融化的方法,雖然很多人在這么用,但還是有一些潛在的風(fēng)險的。
我們都知道,在血清這種混合物中,融化速度:蛋白質(zhì)等干物質(zhì)>水這類(lèi)溶劑,所以蛋白質(zhì)會(huì )先溶解析出,而水還是結成冰的狀態(tài),導致瓶子中間會(huì )出現一根透明的冰柱,而周?chē)鷦t會(huì )呈現上黃下紅的分層渾濁液的狀態(tài),在使用過(guò)程中很容易引起沉淀、混合不均勻、局部濃度過(guò)高等問(wèn)題,影響細胞生長(cháng)。
更重要的一點(diǎn)是,血清中珍貴的生長(cháng)因子等活性物質(zhì),它們在解凍過(guò)程中,有著(zhù)與細胞復蘇類(lèi)似的經(jīng)歷,都需要快速解凍才能盡可能保留生物活性。顯然,4℃過(guò)夜這樣的長(cháng)時(shí)間處理,很有可能會(huì )導致一部分「營(yíng)養成分」的損失,影響細胞生長(cháng)。
所以,為了更好地保留血清中的活性成分,使細胞培養更穩定,我們推薦使用三步法溶解,具體方法見(jiàn)下表,有需要的同學(xué)可以截圖保存。
如果是儲存在-80℃的血清,則需提前幾天先轉移至-20℃冰箱中(至少24小時(shí)),再使用三步法溶解,避免溫差過(guò)大使血清失活。
注:此方法國際通用,適用于所有培養基,在水浴過(guò)程中,血清的平面要浸在水中。在融化過(guò)程中要慢慢搖動(dòng)瓶身,使血清混勻,但搖動(dòng)中盡量不要產(chǎn)生泡沫!
解凍血清后,可以根據實(shí)驗需求,將其分裝,保證每一份夠一次使用量即可,比如:25ml/管、50ml/管等。密封好后趕緊放回-20℃冰箱繼續儲存。需要配制培養基的時(shí)候,再從-20℃冰箱中取出一管來(lái)解凍使用(盡量能全部配成培養基,不要有剩余),可以有效避免反復凍融的問(wèn)題(遵循現用現配、現配現解凍的原則)。配好的培養基可以放到4℃冰箱進(jìn)行儲存。
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4℃存放時(shí)間
看到這里,問(wèn)題又來(lái)了,配好的培養基,或者剩下的那一點(diǎn)點(diǎn)血清,能在4℃冰箱里放多久呢?
先給出我們認為比較合理的答案,再來(lái)解釋原因:
7天
一般情況下,已經(jīng)解凍的血清,無(wú)論是配成完quan培養基還是在冰箱里備用,都不要超過(guò)一周(7天),原因也很簡(jiǎn)單,存放太久,生長(cháng)因子等物質(zhì)容易失活,而且比較容易受到污染,影響實(shí)驗結果。
不知道今天這期內容有沒(méi)有解決大家的疑惑,無(wú)論是國產(chǎn)還是進(jìn)口血清,都不算便宜,這么貴巴巴的試劑,還請小心使用,物盡其用,可不能讓銀子白花!