高效復蘇細胞有沒(méi)有什么秘訣？

細胞培養的開(kāi)始，就是復蘇細胞。如何有條不紊地讓細胞從沉睡中蘇醒？今天就來(lái)給大家總結幾個(gè)實(shí)用小技巧，快點(diǎn)來(lái)get！

細胞復蘇流程：

1、將凍存的細胞從液氮罐中取出，立即放入37°C的水浴中進(jìn)行融化，輕柔晃動(dòng)，加速融化，直到小瓶中只剩下一小塊冰，時(shí)長(cháng)應控制在1min中；

2、用70%乙醇擦拭瓶外后轉移無(wú)菌操作臺中，打開(kāi)瓶蓋前，用酒精燈火焰對瓶口進(jìn)行消毒；

3、將預加熱的新鮮完quan培養基滴入小瓶中。緩慢用移液槍吸取瓶中液體至15ml離心管中，加入適量濃度和體積的完quan培養基，輕柔混合均勻；

4、200 × g左右細胞懸浮液離心5-10分鐘。實(shí)際的離心速度和持續時(shí)間因細胞類(lèi)型而異。棄掉上清，加入新鮮完quan培養基重懸細胞，并將其轉移到適當的培養容器和推薦的培養環(huán)境中。

細胞解凍流程圖

注意事項：

1、液氮溫度低，小心低溫對人造成的傷害，在液相中儲存的冷凍瓶在解凍時(shí)存在爆炸的風(fēng)險，因此，取出凍存管的時(shí)候，要做好個(gè)人防護。

2、通常細胞集中儲藏在液氮中，取出時(shí)應迅速，避免溫差對其他凍存細胞造成影響。

3、復蘇細胞的核心技術(shù)，簡(jiǎn)而言之就是快融，將在37°C水浴中快速解凍冷凍細胞(< 1分鐘）。

4、解凍時(shí)，凍存管先放入無(wú)菌一次性PE手套中，再放入水中融化，避免污染也方便操作。

5、用預熱過(guò)的培養基慢慢稀釋解凍的細胞。

6、解凍細胞后，在培養皿中培養時(shí)，應盡量維持高密度，以提高細胞存活率。

7、注意無(wú)菌操作，避免細胞發(fā)生污染。

細胞高效解凍的另一個(gè)成功秘訣，就是選擇一款優(yōu)質(zhì)血清！

Ausbian進(jìn)口特級胎牛血清，有以下優(yōu)點(diǎn)，可以盡可能幫助實(shí)驗者提高細胞實(shí)驗成功率：

1. 精選內毒素更低批次（≤3EU/ml）。是細胞典藏等重大項目十幾年的穩定供應品牌。

實(shí)驗室有些細胞，需要長(cháng)期培養、長(cháng)期凍存，或者經(jīng)常復蘇、經(jīng)常培養的，血清會(huì )經(jīng)?；蜷L(cháng)時(shí)間作用于細胞。為保證細胞的健康，都應該選用更低內毒素的血清，以避免內毒素長(cháng)久對細胞的毒性影響。

2. 新批次在試用前，提供試用服務(wù)，養細胞更放心。

3. 每個(gè)批次產(chǎn)量800-2000升，試用滿(mǎn)意的實(shí)驗室批號優(yōu)先鎖定，保證大多數項目?jì)赡瓴恍钃Q批次，細胞試驗數據穩定。

4. 每年按廠(chǎng)家生產(chǎn)順序，會(huì )有多批次平行供應，每個(gè)實(shí)驗室專(zhuān)屬批號管理，保證供貨穩定。

5. 為Ausbian血清用戶(hù)免費提供申報支持，具有完整的檢測報告，為各類(lèi)項目的申報提供支持（同時(shí)為血清VIP用戶(hù)在支原體檢測、方法學(xué)驗證等方面，提供更多免費延伸性技術(shù)幫助）。

6. 針對特殊科研項目，可提供3-5個(gè)平行批次，讓試驗人有更多選擇空間。

7. 為Ausbian血清提供免費代儲存服務(wù)，為儲存空間不足的實(shí)驗室提供可靠的血清倉儲保護，按要求隨時(shí)發(fā)貨。

8. Ausbian血清從出廠(chǎng)，到實(shí)驗室，全程低溫冷鏈保護，確保血清無(wú)反復凍融。

9. 免費真品保障，每個(gè)血清瓶身加貼Viansaga®易破損防偽標簽，Ausbian品牌真品保護，逢假必究，為實(shí)驗室做好售后保障。

10. 免費無(wú)憂(yōu)售后，所有實(shí)驗室簽收的Ausbian胎牛血清，從簽收日開(kāi)始計算，一年之內，血清在妥善保管、未開(kāi)封未融化、且不影響二次銷(xiāo)售的情況下，均可享受無(wú)條件退貨或換貨的售后保障。

11. 免費專(zhuān)業(yè)幫助，匯集近二十年，千萬(wàn)個(gè)血清用戶(hù)細胞培養經(jīng)驗，為各種細胞培養提供問(wèn)題梳理分析，解決方案參考。