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盤(pán)點(diǎn)細胞培養中,內毒素的影響

更新時(shí)間:2023-04-19  |  點(diǎn)擊率:452

內毒素是革蘭氏陰性細菌的細胞壁成分,通常在用于細胞培養的胎牛血清(FBS)中發(fā)現。FBS中內毒素的存在會(huì )對細胞生長(cháng)和活力產(chǎn)生負面影響,并可能導致不準確的實(shí)驗結果。

 

內毒素可以激活免疫細胞,誘導促炎細胞因子的釋放,從而導致細胞死亡,抑制細胞增殖。它們還可以干擾細胞過(guò)程,如DNA合成和蛋白質(zhì)表達,從而影響實(shí)驗結果。

 

有下列情況者,對血清內毒素應格外留意篩選:

 

1.養干細胞時(shí),干細胞對內毒素非常敏感,如果血清中內毒素≥3EU/ml時(shí),干細胞很容易死亡。很多使用者,在血清在試用前,就通過(guò)提早審核該批次《檢測報告》,以決定是否入圍進(jìn)行試用。

 

2.養免疫細胞時(shí),過(guò)高的內毒素可誘導免疫細胞釋放炎癥因子,抑制小鼠紅細胞集落的形成等。

 

3.基因敲除相關(guān)的細胞實(shí)驗,培養的細胞要盡可能保持其原始狀態(tài),任何引導細胞衰老或凋亡的試劑,都會(huì )讓后續的實(shí)驗結果失之毫厘,謬以千里"。在準備血清和其他試劑時(shí),選擇極低的內毒素(jinliang ≤1EU/ml),對實(shí)驗至關(guān)重要;

 

4.原代培養、雜交瘤融合、細胞轉染,或者肝細胞、神經(jīng)細胞、內皮等難養細胞的擴增,這些都需要挑選好的血清給細胞以有力支持。因此,挑選更低的內毒素,是保證實(shí)驗順利的**步。

 

5.實(shí)驗室有些細胞,需要長(cháng)期培養、長(cháng)期凍存,或者經(jīng)常復蘇、經(jīng)常培養的,血清會(huì )經(jīng)?;蜷L(cháng)時(shí)間作用于細胞。為保證細胞的健康,都應該選用更低內毒素的血清,以避免內毒素長(cháng)久對細胞的毒性影響。

 

為了盡量減少內毒素對細胞培養的影響,建議使用經(jīng)過(guò)測試和認證的內毒素水平較低的FBS。重要的是要注意,從胎牛血清中去除所有內毒素并不太現實(shí),但過(guò)高的內毒素殘留水平,仍可能對細胞培養產(chǎn)生影響。因此,仔細監測胎牛血清對細胞生長(cháng)和活力的影響,并選擇一款內毒素含量低的血清是很重要的。

 

締一生物的Ausbian進(jìn)口胎牛血清,內毒素含量低,≤3EU/ml,為細胞實(shí)驗保駕護航。


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