血清說(shuō)明書(shū)——儲存、解凍、使用方法

1、長(cháng)期儲存：

血清在生產(chǎn)制備完成后，通過(guò)質(zhì)量檢測，然后被運送至市場(chǎng)上銷(xiāo)售。整個(gè)過(guò)程中，包括運輸流程，儲存溫度應嚴格保證在-20℃，避免反復凍融影響血清活性。

實(shí)驗人員在收到血清，檢查完好后，及時(shí)將血清送至-20℃冰箱中儲存，用時(shí)再取出采用三步法解凍。

在未解凍的情況下，血清可長(cháng)期儲存在在-20℃或-80℃環(huán)境中，只要是在保質(zhì)期內，均能正常使用。

儲存過(guò)程中，需要定期監控儲存血清的冰箱中，溫度是否符合規定，保證冰箱制冷效果（-20℃）是否正常，盡量避免出現溫度大幅度的波動(dòng)的情況，防止血清因溫度變化而反復凍融的情況出現。

另外，盡量將血清獨立存放于一定區域（恒溫區域），避免反復開(kāi)關(guān)冰箱門(mén)對儲存溫度造成影響。

2、在4℃冰箱中的儲存：

解凍后的血清，不宜在4℃冰箱中放置過(guò)久。

血清在生產(chǎn)加工運輸過(guò)程中，沒(méi)有添加外源抗菌成分。因此開(kāi)封后，如果長(cháng)期保存在使用頻率高且潔凈度差的4℃冰箱中，很容易染菌。

如果配制為培養基，添加了雙抗，可以在一定程度上減少培養基污染的風(fēng)險，但是由于基礎培養基的添加，使得整體成分更為復雜，保存不當則會(huì )使有效物質(zhì)活性降低。

因此，我們建議，添加了血清的培養基盡量做到現配現用；解凍后的血清不要長(cháng)期儲存在4℃冰箱中，盡可能不要超過(guò)7天。

當血清需要被解凍時(shí)，我們不建議大家把剛從-20℃中拿出的冰凍血清，直接放入4℃冰箱中過(guò)夜融化，也不要在室溫進(jìn)行過(guò)夜解凍。

由于血清含有蛋白質(zhì)等干物質(zhì)，這類(lèi)物質(zhì)容易先融化析出，水這類(lèi)溶劑后融化，導致血清產(chǎn)生沉淀，影響使用效果。

因此，要盡可能保證所有成分同步融化，因此我們建議使用三步法融化，具體步驟見(jiàn)下表。

需要注意的是，如果血清是儲存在-80℃冰箱中，三步法解凍前，應先將血清轉移至-20℃冰箱中存放1-2天。

一次解凍后，分裝至無(wú)菌離心管中，盡量保證每管是一次的用量，分裝管解凍也遵循三步法，解凍后需全部用完。

1、血清的熱滅活：

血清進(jìn)行熱滅活的目的是，利用較高的溫度使補體失活。由于胎牛血清會(huì )嚴格控制采血時(shí)間為5-8月齡的胎牛，此時(shí)還未形成完整的補體系統，因此，合格的胎牛血清，是不需要滅活的。

但是實(shí)驗中如果需要新生牛血清、小牛血清、豬血清或馬血清這些血清時(shí)，則需要根據實(shí)驗要求而定。

根據血清廠(chǎng)家多年來(lái)總結的經(jīng)驗，常規解凍后，40℃水浴加熱20分鐘即可，能夠盡可能地保留營(yíng)養成分。

2、細胞培養的應用：

對于新的細胞系或從無(wú)血清培養轉變到胎牛血清培養的細胞系，需要進(jìn)行適應期。在初始適應期，可以將血清濃度逐漸降低，直到細胞適應無(wú)血清培養為止。

3、關(guān)注血清的批次：

相同品牌的胎牛血清，在蛋白質(zhì)含量等方面，可能會(huì )存在批次差異，因此在同一實(shí)驗中最好使用來(lái)自同一批次的血清，以減少變異性。如果不得不使用不同批次的胎牛血清，請進(jìn)行驗證實(shí)驗以確保結果的可重復性。

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