問(wèn)題1::血清沉淀會(huì )影響細胞生長(cháng)嗎?
答:如果運輸過(guò)程中,出現了溫度忽高忽低,反復凍融的情況,就容易析出大量沉淀。另外,不正確的解凍方法也會(huì )引起血清產(chǎn)生大量沉淀。但一般情況下,沉淀物不會(huì )影響細胞培養,但如果細胞對于營(yíng)養物質(zhì)有特殊需求,沉淀物中的成分不能被細胞吸收,可能會(huì )引起細胞長(cháng)勢較差。
問(wèn)題2:血清沉淀會(huì )影響細胞實(shí)驗嗎?
答:會(huì )影響血清過(guò)濾。一些特殊實(shí)驗中,需要對細胞培養基進(jìn)行過(guò)濾,如果血清中出現大量的沉淀物,混入培養基中,會(huì )導致過(guò)濾孔被堵塞,影響過(guò)濾效果。多數情況下,血清沉淀會(huì )對我們判斷細胞是否出現污染造成困擾。絮狀沉淀容易和真菌、細菌混淆;磷酸鈣沉淀引起的小黑點(diǎn)容易與支原體污染混淆。
問(wèn)題3:血清沉淀導致細胞污染嗎?
答:一般情況下,正常的沉淀物不會(huì )導致細胞污染。需要注意的是,如果血清保存不當或使用過(guò)程中操作失誤,導致血清被微生物、細胞等物質(zhì)污染,反而會(huì )引起血清產(chǎn)生沉淀。
在細胞培養過(guò)程中,選擇高品質(zhì)的血清對于維持實(shí)驗結果的穩定十分重要。
Ausbian澳洲進(jìn)口特級胎牛血清在細胞培養中的作用:
1.提供對維持細胞指數生長(cháng)的激素,基礎培養基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養物,以及主要的低分子營(yíng)養物。
2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類(lèi)、金屬和其他激素等,能結合或調節它們所結合的物質(zhì)活力。
3.有些情況下結合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結合,起到解毒作用。
4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質(zhì)上所需因子來(lái)源。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
7.參與細胞凍存。
在細胞培養中,胎牛血清加入基礎培養基的濃度大多為5%~20%(最常見(jiàn)為10%)的。具體到不同試驗,應依據文獻報導,或細胞類(lèi)型或基礎培養基的成分來(lái)確定適宜濃度。胎牛血清應在-20℃儲存,運輸應干冰冷鏈運輸,避免反復凍融,確保血清中因子活性不受影響,保證血清優(yōu)良品質(zhì)。