一般情況下,血清沉淀不會(huì )影響細胞培養效果,但是出于一致性等方面的考慮,還應盡可能減少在使用或運輸過(guò)程中,人為因素導致的血清沉淀。
1、正確的運輸溫度:運輸過(guò)程中,要嚴格-20℃低溫,避免反復凍融。
2、使用正確的融化方法:在使用時(shí),正確的解凍方法也很重要,這里推薦使用國際上通用的“三步法"解凍。
需要注意的是,如果血清是儲存在-80℃冰箱中,正式解凍前應先轉移至-20℃冰箱中過(guò)渡。一次解凍后,分裝至無(wú)菌離心管中,盡量保證每管是一次的用量,分裝管解凍也遵循三步法,解凍后需全部用完。
3、使用正確的儲存方式:長(cháng)期儲存在 2-8℃或在室溫下放置時(shí)間過(guò)長(cháng),都會(huì )引起沉淀,建議配制好的培養基在4℃冰箱中存放不要超過(guò)7天,血清分裝好后-20℃儲存。
4、特殊的處理:γ射線(xiàn)照射與熱滅活也容易引起沉淀析出,因此要注意射線(xiàn)照射劑量以及熱滅活方法(40℃水浴加熱20分鐘即可)。常規實(shí)驗中用到的胎牛血清,無(wú)需熱滅活。
那么,如果想去除細胞培養過(guò)程中,血清中沉淀,又該如何操作呢?
如果要除去血清中的沉淀,可以將血清分裝至無(wú)菌離心管中,大約400g 離心,留上清即可。由于濾膜容易被沉淀堵塞,因此不建議用過(guò)濾的方法。
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