脫脂胎牛血清與常規胎牛血清相比,包括去除內源性脂類(lèi)、磷脂、甘油三酯、脂肪酸、游離脂肪酸和膽固醇等成分在內的脂類(lèi)物質(zhì)含量更低,適合一些對脂類(lèi)敏感的細胞系、脂質(zhì)代謝研究或動(dòng)脈硬化研究。。
脫脂胎牛血清的處理方法有很多,常見(jiàn)的主要有以下幾種:
1、離心法:該方法是應用比較廣泛的方法之一。先將胎牛血清放入離心管中,然后進(jìn)行高速離心。在高速離心的作用下,脂質(zhì)會(huì )聚集在血清樣品的表面形成一層脂肪沉淀,然后可以通過(guò)小心地將上清液(脫脂后的液體部分)分離出來(lái),從而減少脂質(zhì)含量。
2、超濾法:超濾是另一種脫脂的方法,通過(guò)使用特殊的過(guò)濾器來(lái)分離脂質(zhì)。這些過(guò)濾器的孔徑足夠小,可以阻止脂質(zhì)通過(guò),但允許其他組分通過(guò)。通過(guò)使用不同孔徑的過(guò)濾器,可以控制去除的脂質(zhì)量。
3、溶劑提取法:溶劑提取法使用有機溶劑,如氯仿或甲醇,來(lái)提取脫脂胎牛血清中的脂質(zhì)。這個(gè)過(guò)程中,脂質(zhì)會(huì )溶解到有機溶劑中,然后可以通過(guò)蒸發(fā)溶劑來(lái)去除脂質(zhì)。
4、膜過(guò)濾法:膜過(guò)濾法(例如3 x 100 nm濾膜過(guò)濾)使用特殊的脫脂膜來(lái)分離脂質(zhì)。這些膜通常是親水性的,可以阻止脂質(zhì)通過(guò),但允許其他成分通過(guò)。脫脂胎牛血清通過(guò)這些膜時(shí),脂質(zhì)會(huì )被濾除。
5、凝膠過(guò)濾法:凝膠過(guò)濾法使用凝膠柱將脫脂胎牛血清通過(guò),脂質(zhì)會(huì )被凝膠吸附。然后,純凈的血清可以從凝膠柱中洗出。
6、其他方法,也有一些研究表明通過(guò)在FBS中加入氣相二氧化硅(Sigma, S5130, 20 g/L),混合過(guò)夜,離心,無(wú)菌過(guò)濾,也可以得到去脂胎牛血清。
Ausbian澳洲進(jìn)口特級胎牛血清在細胞培養中的作用:
1.提供對維持細胞指數生長(cháng)的激素,基礎培養基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養物,以及主要的低分子營(yíng)養物。
2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類(lèi)、金屬和其他激素等,能結合或調節它們所結合的物質(zhì)活力。
3.有些情況下結合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結合,起到解毒作用。
4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質(zhì)上所需因子來(lái)源。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
7.參與細胞凍存。
在細胞培養中,胎牛血清加入基礎培養基的濃度大多為5%~20%(最常見(jiàn)為10%)的。具體到不同試驗,應依據文獻報導,或細胞類(lèi)型或基礎培養基的成分來(lái)確定適宜濃度。胎牛血清應在-20℃儲存,運輸應干冰冷鏈運輸,避免反復凍融,確保血清中因子活性不受影響,保證血清優(yōu)良品質(zhì)。