細胞細菌污染癥狀及處理方法

 細菌污染是生物實(shí)驗室，在培養細胞的過(guò)程，常見(jiàn)的問(wèn)題之一，會(huì )直接引起細胞死亡，影響實(shí)驗進(jìn)度。本期內容，我們匯總了細菌污染的癥狀，并分別給出了應對方法。

細菌是一種原核細胞微生物，一般為微米級別。細胞培養過(guò)程中常見(jiàn)的污染菌為大腸桿菌、葡萄球菌、假單胞菌等。

細胞發(fā)生細菌污染后，有哪些癥狀？與其他污染相比，細菌污染在細胞培養過(guò)程中“發(fā)病"更為迅速，較容易被發(fā)現。具體表現為：
細胞培養液短期內變黃且渾濁（大量酸性物質(zhì)累積）；
靜置的培養液時(shí)不渾濁，但稍加震蕩，就有許多渾濁物漂起；
可見(jiàn)培養液中有大量圓球狀顆粒物漂??；
細胞停止生長(cháng)并有中毒表現，后出現大量死亡；

如何用實(shí)驗來(lái)驗證，細胞是否被細菌污染？常見(jiàn)的染色法、培養法以及PCR方法都可以對細菌污染進(jìn)行檢測。
如果只需要初步判定細胞是否被污染，課選擇涂片染色或培養法對樣品進(jìn)行檢測。
例如：革蘭氏染色法會(huì )使陽(yáng)性菌呈現紫色，陰性菌呈現紅色；向肉湯培養基內滴入少量培養液，37 ℃培養，培養基變渾濁；專(zhuān)業(yè)的PCR檢測：以Minerva Biolabs公司的細菌PCR檢測試劑盒（Onar® Bacteria Detection Kit，貨號：12-1025）為例：
該試劑盒采用PCR方法，用于檢測生物樣品（包括細胞培養物和病毒貯存液）中是否存在細菌。根據序列分析，該試劑盒可檢測超過(guò)45種細菌屬，其中含污染細胞的常見(jiàn)菌屬：


如果細胞不幸遭遇到了細菌污染的侵襲，該如何應對呢？對于常規細胞培養物而言，發(fā)生細菌污染，建議直接將培養物丟棄，并對環(huán)境進(jìn)行消殺，紫外線(xiàn)滅菌、消毒液擦拭培養箱、工作臺等。
對于重要且污染相對較輕的細胞：一般用抗生素的常用量的 5-10 倍作沖擊療法，用藥 24-48 小時(shí)后再換常規培養液，但需要需要注意的是：一旦發(fā)生污染后再使用抗生素常常難以清除干凈，有的抗生素只有抑菌作用而無(wú)殺菌效應。且有研究表明，大量使用抗生素，或對細胞基因組產(chǎn)生影響，該種處理方法屬于“殺敵一千，自損八百"，因此不做推薦。

因此，防范大于治療，在細胞實(shí)驗過(guò)程中，我們不希望看到任何微生物污染的情況發(fā)生。為了避免浪費有限的精力和經(jīng)費，應優(yōu)先預防污染的發(fā)生。實(shí)驗前穿戴好防護用具，既是保護自己，也是保護實(shí)驗材料；定期對實(shí)驗環(huán)境進(jìn)行清潔消毒，也能有效預防微生物污染的發(fā)生。

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