支原體放行檢測的金標準

在生物藥和細胞治療領(lǐng)域，支原體檢測十分重要，它是避免外源因子污染，保證產(chǎn)品質(zhì)量的重要質(zhì)控手段。

我國藥典規定，如下領(lǐng)域需要進(jìn)行支原體檢測：

包括主細胞庫、工作細胞庫、生產(chǎn)終末細胞、檢定細胞、病毒種子批和病毒收獲液、細胞培養相關(guān)材料如培養基、胰酶、臨床治療用干細胞和免疫細胞、

新生牛血清以及雜交瘤細胞等。

我國藥典規定的支原體檢測方法為培養法和指示細胞染色法。但這些方法也存在一些不盡人意之處，如所需時(shí)間較長(cháng)，有的操作復雜等。2017年我國藥品監督管理局發(fā)布了《細胞治療產(chǎn)品研究與評價(jià)技術(shù)指導原則》，其中提到，基于細胞治療藥物的特點(diǎn)，申請人可以開(kāi)發(fā)新型的支原體檢測方法進(jìn)行放行檢測，但是檢測方法應經(jīng)過(guò)充分驗證。即，只要經(jīng)過(guò)充分驗證，新型支原體檢測方法是可以替代藥典方法的。2018年中國醫藥生物技術(shù)協(xié)會(huì )聯(lián)合業(yè)內專(zhuān)家，也起草發(fā)布了《嵌合抗原受體修飾T細胞（CAR-T細胞）制劑制備質(zhì)量管理規范》，里面同樣提到，CAR-T細胞制劑質(zhì)制備后需立即進(jìn)行回輸，可采用經(jīng)過(guò)驗證的快速檢測方法。其中，每批次的CAR-T細胞制劑放行檢測項目也包括支原體檢測。

由于支原體污染容易發(fā)生，且肉眼不易識別，因此常規監測和放行檢測均是需要的。支原體檢測產(chǎn)品生產(chǎn)商德國Minerva Biolabs公司(簡(jiǎn)稱(chēng)MB公司)提供有放行檢測用支原體PCR試劑盒，qPCR試劑盒，支原體DNA提取試劑盒、支原體標準品（包括靈敏度標準品、特異性驗證用標準品以及qPCR定量標準品）。支原體PCR試劑盒和qPCR試劑盒均經(jīng)廠(chǎng)家全面驗證（包括靈敏度、特異性和耐用性），達到歐洲藥典（EP 2.6.7）和日本藥典（JP G3）要求。每個(gè)批次產(chǎn)品均有廠(chǎng)家的質(zhì)檢報告（COA）。