透析胎牛血清：制備與應用

胎牛血清是廣泛用于細胞培養基的重要成分，提供了多種生物活性物質(zhì)，包括激素、生長(cháng)因子、脂質(zhì)、礦物質(zhì)、黏附和鋪展因子，以促進(jìn)體外細胞培養。然而，在特定研究領(lǐng)域，透析胎牛血清也被用于滿(mǎn)足研究需求。下文將從生產(chǎn)工藝和應用方面對透析胎牛血清進(jìn)行綜合介紹，以促進(jìn)相關(guān)研究和應用的進(jìn)行。

1. 透析胎牛血清的制備

a. 透析胎牛血清是基于普通胎牛血清進(jìn)行特殊處理的產(chǎn)品。在制備過(guò)程中，普通胎牛血清需要經(jīng)過(guò)嚴格的無(wú)菌處理，包括0.1微米膜三重過(guò)濾以及各項檢測，如理化性質(zhì)（如滲透壓和pH值），成分（如內毒素和血紅蛋白）以及外源因子（如細菌、病毒和支原體），以確保其質(zhì)量和安全性。

b. 透析胎牛血清的制備涉及透析過(guò)程，通過(guò)特定的透析膜在4°C下將血清透析在0.15M NaCl中。這個(gè)透析膜只允許小于10 kDa的小分子通過(guò)，這些小分子在滲透壓的作用下從血清中滲析到透析膜外的NaCl溶液中。透析的終止通常是當血清中葡萄糖濃度降至<5 mg/dL時(shí)，但透析過(guò)程還需要仔細監測pH值和滲透壓。

c. 透析過(guò)程采用切向流過(guò)濾，即流體與過(guò)濾方向垂直的過(guò)濾方式，以減小濾膜上的物質(zhì)堆積，確保穩定的過(guò)濾速度。

2. 透析胎牛血清的應用

透析胎牛血清主要用于特殊研究領(lǐng)域，其中需要關(guān)注小分子濃度的應用，包括以下四個(gè)領(lǐng)域，它們有時(shí)相互交叉。

a. 同位素標記技術(shù)在細胞培養中的應用。

同位素標記技術(shù)，例如Stable isotope labeling with amino acids in cell culture (SILAC)，是一種基于質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)。它通過(guò)將13C或15N標記的氨基酸引入培養基，標記細胞內新合成的蛋白質(zhì)，用于比較不同處理下的細胞蛋白質(zhì)豐度。透析胎牛血清可用于排除天然氨基酸的干擾，以確保標記氨基酸的準確性。

b. 工程細胞株的篩選。

例如，CHO-DFGRˉ細胞株需要在培養基中添加次黃嘌呤、胸腺嘧啶和甘氨酸才能生存。透析胎牛血清可用作選擇培養基的一部分，以幫助篩選經(jīng)過(guò)基因工程的細胞株。

c. 研究某些因子對細胞增殖和分化的影響。

透析胎牛血清可用于研究核苷酸、微量元素等對細胞的影響，以避免培養體系中的干擾物質(zhì)。