透析胎牛血清做滅活處理，應該怎么處理呢

　　將該病毒的F蛋白（融合蛋白）序列克隆入質(zhì)粒內，并轉染293T細胞。轉染后第20小時(shí)，細胞先在不含蛋氨酸和半胱氨酸的DMEM+透析胎牛血清中培養了45分鐘（讓細胞處于饑餓狀態(tài)，因培養基中缺少氨基酸），再在同樣上述培養基中培養，但添加了35S標記的蛋氨酸和半胱氨酸。

　　培養4小時(shí)后進(jìn)行分析。即裂解細胞后，用抗F蛋白的抗體捕獲F蛋白、跑膠并進(jìn)行放射自顯影，分析F蛋白的表達情況。發(fā)現F蛋白的表達確實(shí)增加了，但突變后的F蛋白表達卻無(wú)任何變化。結果證實(shí)，野生型的F蛋白確實(shí)參與病毒對宿主細胞的侵襲。

　　值得指出的是，用35S標記的蛋氨酸和半胱氨酸用來(lái)標記細胞內的蛋白，結合免疫沉淀用于觀(guān)察在某一過(guò)程中發(fā)生的某一蛋白的變化，從而發(fā)現該蛋白所扮演的角色，的確是一個(gè)普遍有效的方法（在研究信號分子磷酸化的方面，則需要使用32P標記的磷酸鹽）。

　　透析胎牛血清是否需要做滅活處理？這取決于您的應用。

　　滅活過(guò)程中，會(huì )導致血清中某些成分被破壞，如氨基酸，維生素，生長(cháng)因子等。所以只有在您的實(shí)驗對血清有特殊要求時(shí)，才會(huì )考慮對血清進(jìn)行滅活處理。如您的實(shí)驗對血清中的某種組分敏感，需要去除該組分。常見(jiàn)的情況是需要去除血清中的補體蛋白，因為補體在機體中參與細胞殺傷，巨噬細胞和淋巴細胞活化，肥大細胞和血小板組胺釋放，平滑肌收縮等過(guò)程，所以一般在免疫學(xué)相關(guān)研究中及肌細胞和干細胞的培養過(guò)程中需要對血清進(jìn)行滅活處理。