教你了解大腸桿菌O157：H7的傳統檢測方法

食源性致病菌的檢測方法多種多樣，傳統的檢測方法主要分為三類(lèi)：培養和菌落計數法、免疫分析法和分子生物學(xué)方法。本文締一生物主要問(wèn)您介紹大腸桿菌O157：H7的傳統檢測方法。

傳統的方法是培養和菌落計數法，即將可疑物的樣本放在合適的條件下培養，統計菌落數目，并經(jīng)過(guò)一系列的生化鑒定得出結果，本文將以我國檢測大腸桿菌O157:H7的國家標準為例，介紹培養計數法檢測大腸桿菌O157:H7的具體操作，圖１給出了培養和菌落計數法的一般流程，主要依據國標GB4789.36—2016《食品安全國家標準 食品微生物學(xué)檢驗 大腸埃希氏菌O157:H7/NM檢驗》的方法。

通常情況下，樣品中的細菌含量較低，無(wú)法迗到可檢測的濃度，所以先是增菌。培養18-24小時(shí)之后取菌液涂布于麥康凱選擇培養基上進(jìn)行分離。很多細菌都會(huì )發(fā)酵山梨醇，產(chǎn)生紅色菌落，而不發(fā)酵山梨醇的大腸桿菌O157:H7在麥康凱選擇培養基（CT-SMAC 平板）上產(chǎn)生無(wú)色或者灰色的菌落。

這里推薦一款好用的CT-SMAC 平板，上微生物生產(chǎn)商HiMedia公司生產(chǎn)的大腸桿菌O157：H7顯色培養基CT—SMAC平板（貨號：M1340）。這是一款特異性強，靈敏度高的CT—SMAC平板。培養基中含有山梨醇，大腸菌群如肺炎克雷伯菌發(fā)酵山梨醇，產(chǎn)生粉紅色菌落，大腸桿菌O157:H7不發(fā)酵山梨醇，為無(wú)色菌落。普通大腸桿菌則被鑒別為藍綠色。大多數革蘭氏陽(yáng)性菌被結晶紫和膽鹽抑制，優(yōu)于普通的CT—SMAC平板。

后續進(jìn)一步的血清學(xué)和生化試驗鑒定，生化反應特征如表1。這種方法從２０世紀初開(kāi)始使用，具有靈敏準確、成本低廉（8-12美元／樣本）適用范圍廣等特點(diǎn)，被認為是檢測微生物污染的金標方法。

表1大腸桿菌O157:H7／NM生化反應特征

通常情況下，微生物繁殖很快，即使加工食品中起始含量很低也能通過(guò)在儲存和運輸過(guò)程中的生長(cháng)累積到一定的數量，從而對人體健康造成極大的威脅。所以，在尚未造成危害之前進(jìn)行檢測并采取一定的措施，對降低進(jìn)一步污染，為政府和消費者提供及時(shí)可靠的數據，預防食源性疾病的暴發(fā)和擴大具有極為重要的意義。

締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商，在微生物培養和檢測領(lǐng)域，一如既往地為您帶來(lái)的服務(wù)。