血清培養基存在哪些問(wèn)題

人類(lèi)歷*的次培養動(dòng)物細胞時(shí)所用的添加物是動(dòng)物血清（如新生牛血清、優(yōu)級胎牛血清等，添加量一般在5%～15%之間)等天然的動(dòng)物體液性補充物。這些天然的體液性補充物可以在較長(cháng)的一段時(shí)間里維持細胞生長(cháng)。它們主要是可以向培養細胞提供激素、生長(cháng)因子、貼壁因子、結合蛋白和其它營(yíng)養物質(zhì)等。然而，盡管血清對細胞具有良好的生長(cháng)促進(jìn)作用，但使用血清作為培養基的添加劑依然存在很多問(wèn)題。

高成本和可用性問(wèn)題

血清作為培養基中的重要營(yíng)養物質(zhì)來(lái)源，血清可占總體成本的85%～90％。比如在新西蘭等發(fā)達國家，其血清成本花費高達500~1000美元/L不等。另外，含血清培養基的可用性也各有不同，特別是對于那些關(guān)注動(dòng)物福利的國家，當地居民對動(dòng)物獲得血清的行為極其抵制。

倫理問(wèn)題

從牛胎兒中獲得血清引起了社會(huì )對動(dòng)物福利的關(guān)注，如對實(shí)驗動(dòng)物造成傷害，存在著(zhù)道德和倫理上的問(wèn)題。

血清批間差異問(wèn)題

季節的交替、地域的跨越、動(dòng)物個(gè)體或群體的差異，這些不同均會(huì )造成血清的批次間差異。另外，血清的組成存在可變性和不一致性，這也會(huì )導致培養基對細胞具有不一致的促生長(cháng)能力。此外，每批培養基的質(zhì)量會(huì )隨著(zhù)供體奶牛的飲食和身體狀況的變化而變化。這種變化也會(huì )導致培養基的促生長(cháng)特性發(fā)生顯著(zhù)差異，導致細胞培養過(guò)程的生長(cháng)能力和速度的巨大差別。

成分問(wèn)題

動(dòng)物血清成分復雜，其包含有促進(jìn)細胞生長(cháng)的重要營(yíng)養物質(zhì)和活性成分。還含有少量的細胞毒性物質(zhì)和抑制成分，這些成分會(huì )影響細胞的生長(cháng)與表達。此外，在生物反應器中生長(cháng)的細胞通常是將目標產(chǎn)物（一般是蛋白質(zhì)）分泌到培養基質(zhì)中。

高污染風(fēng)險問(wèn)題

污染通常來(lái)自存在于動(dòng)物血清中的病毒和支原體以及與牛海綿狀腦病相關(guān)的朊病毒。有研究表明35％～50％的商業(yè)含血清培養基是病毒陽(yáng)性。另有研究表明，來(lái)源于肉制品的新型Creutzfeldt-Jakob?。ㄈ祟?lèi)版本的牛海綿狀腦?。┑陌l(fā)生很大原因要歸咎于培養基中添加了牛血清。雖然被污染的生物制劑可能不會(huì )走向市場(chǎng)，但也沒(méi)有人想要在制造的生物制藥中冒這種污染的風(fēng)險去生產(chǎn)。

血清培養基帶來(lái)的諸多隱患，逐漸被人們認識。近年來(lái)，無(wú)血清細胞培養基逐漸盛行，

締一生物為您介紹一款可無(wú)血清培養的細胞培養基，基礎培養基M199的改良款，由HiMedia公司生產(chǎn)的SFRE199系列，該系列有兩款產(chǎn)品SFRE199-1和SFRE199-2。SFRE199系列起初是用于培養狒狒腎Bak細胞的。

有報道，在SFRE199-1生長(cháng)的原代Bak細胞的群體二倍分裂時(shí)間(PDT)約為34.2小時(shí)，與加有5%牛血清的HLH(含水解乳白蛋白的HBSS)相同，加有3%胎牛血清的M199的PDT為36小時(shí)。如果在SFRE199-1中去除胰島素或硫酸鋅，則細胞不能融合，PDT延長(cháng)。若含有胰島素和硫酸鋅，則其支持生長(cháng)的能力相當于標準對照血清培養基。

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