研究雙歧桿菌的利器

雙歧桿菌是革蘭氏陽(yáng)性有分叉的桿菌（Y型，如兩歧雙歧桿菌；也有V型，如嬰兒雙歧桿菌或短桿狀，如長(cháng)雙歧桿菌）。它越來(lái)越得到人類(lèi)的重視。它作為人類(lèi)腸道的長(cháng)期定居菌（在嬰兒中甚至為顯著(zhù)優(yōu)勢菌），對人的生理作用起到不可忽視的影響，例如：它刺激機體的免疫反應，形成腸道屏障，阻止致病菌的入侵，合成人體所需的維生素等。雙歧桿菌制劑常用于治療菌群失調、腹瀉、幽門(mén)螺桿菌陽(yáng)性的消化道潰瘍等疾病。在酸奶中加入雙歧桿菌作為發(fā)酵菌種，其保健效果也大為提高。曾有的微生物學(xué)家指出：“光輝的抗生素之后的時(shí)代，將是活菌制劑的時(shí)代”。

鑒于雙歧桿菌的重要價(jià)值，我們常需要將雙歧桿菌同其他乳酸菌區別開(kāi)來(lái)?，F有的《食品安全國家標準 食品微生物學(xué)檢驗 雙歧桿菌檢驗》存在一定的局限，在鑒定方面，這個(gè)標準只適合食品中僅含有單一雙歧桿菌菌種的鑒定。在計數方面，它只適合食品中僅含有雙歧桿菌屬的計數。而在實(shí)際情況中，常常是多個(gè)菌屬混雜的情況。HiMedia開(kāi)發(fā)的雙歧桿菌顯色培養基HiCrome™
Bifidobacterium Agar，可很好地將雙歧桿菌同乳桿菌區分開(kāi)來(lái)。

該培養基除了含有必要的營(yíng)養外，還含有牛奶蛋白，它有助于檢測酪蛋白水解反應。如有該反應，則菌落會(huì )有不透明光暈（短雙歧桿菌為該反應陽(yáng)性）；同時(shí)含有多種顯色劑，有助于鑒別乳桿菌和雙歧桿菌。乳桿菌菌落在該培養基上表現為綠色菌落和不透明光暈，嬰兒雙歧桿菌表現為深藍色至藍綠色菌落，短雙歧桿菌表現為粉紅色菌落，有不透明光暈（見(jiàn)下圖）。

HiMedia還提供有雙歧桿菌的生化鑒定試劑盒（貨號KB021），該試劑盒包含了12種生化試驗，為觸酶試驗、阿拉伯糖試驗、纖維二糖試驗、果糖試驗、乳糖試驗、麥芽糖試驗、甘露糖試驗、蜜二糖試驗、棉子糖試驗、蔗糖試驗、木糖試驗、水楊苷試驗。所調菌落可接種在５ml雙歧桿菌肉湯（M1395）中，35-37℃厭氧培養6-18小時(shí)，直到菌液濁度≥0.1OD（620nm）或0.5麥氏單位。然后無(wú)菌打開(kāi)試劑盒，撕掉封條。在鑒定卡中每孔接種50μl菌液，35℃-37℃厭氧孵育24-48小時(shí)。孵育后，完成觸酶試驗，在第1孔用接種環(huán)在孔內培養基生長(cháng)表面刮擦取樣，然后蘸到含3%H2O2溶液的干凈試管中。接種環(huán)表面冒泡為陽(yáng)性反應。沒(méi)有冒泡為陰性反應。然后根據結果詮釋表和菌種標準表，完成菌種鑒定。該試劑盒一共可鑒定35種雙歧桿菌。

HiMedia公司還提供了一款雙歧桿菌選擇性計數瓊脂（貨號M1734），用于發(fā)酵乳和乳酸菌飲品中的雙歧桿菌計數。該培養基含有高純度的低聚半乳糖，很好的支持雙歧桿菌生長(cháng)；同時(shí)含有鹽酸半胱氨酸，創(chuàng )造出雙歧生長(cháng)所需的還原條件；而培養基中的莫匹羅星則抑制大多數的乳業(yè)所用的乳酸菌生長(cháng)。用標準菌株證實(shí)，接種的50-100CFU雙歧桿菌能在該培養基中旺盛生長(cháng)。

雙歧桿菌的鑒定有助于選育優(yōu)良的雙歧桿菌菌株，開(kāi)發(fā)雙歧桿菌發(fā)酵飲品或制劑。在這方面，HiMedia的雙歧桿菌顯色培養基、生化鑒定試劑盒以及還可提供的雙歧桿菌選擇性計數瓊脂，無(wú)疑為研究人員和質(zhì)檢人員對雙歧桿菌的分離、鑒定和計數提供了極大的便利。