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簡(jiǎn)析透析胎牛血清的應用

更新時(shí)間:2020-08-24  |  點(diǎn)擊率:739

胎牛血清常用于細胞培養。但有一些實(shí)驗則需要透析胎牛血清。

 

下面小編就來(lái)和大家講一下透析胎牛血清。

 

透析胎牛血清和胎牛血清的唯yi區別是,前者透析祛除了分子量在1萬(wàn)以下的小分子,如葡萄糖、鹽、氨基酸、激素,此外在其他工藝方面沒(méi)有任何區別。

透析胎牛血清也是用于細胞培養,但同時(shí),又有自己的一些特殊應用。其用途可歸納如下:

 

一、摻入研究

例如:有人研究呼吸道合胞病毒的宿主特異性:即為什么它只感染呼吸道上皮細胞,而不感染其他細胞。

他們將該病毒的F蛋白(融合蛋白)序列克隆入質(zhì)粒內,并轉染293T細胞。轉染后第20小時(shí),細胞先在不含蛋氨酸和半胱氨酸的DMEM+透析胎牛血清中培養了45分鐘(讓細胞處于饑餓狀態(tài),因培養基中缺少氨基酸),再在同樣上述培養基中培養,但添加了35S標記的蛋氨酸和半胱氨酸。

 

培養4小時(shí)后進(jìn)行分析。即裂解細胞后,用抗F蛋白的抗體捕獲F蛋白、跑膠并進(jìn)行放射自顯影,分析F蛋白的表達情況。發(fā)現F蛋白的表達確實(shí)增加了,但突變后的F蛋白表達卻無(wú)任何變化。結果證實(shí),野生型的F蛋白確實(shí)參與病毒對宿主細胞的侵襲。

 

值得指出的是,用35S標記的蛋氨酸和半胱氨酸用來(lái)標記細胞內的蛋白,結合免疫沉淀用于觀(guān)察在某一過(guò)程中發(fā)生的某一蛋白的變化,從而發(fā)現該蛋白所扮演的角色,的確是一個(gè)普遍有效的方法(在研究信號分子磷酸化的方面,則需要使用32P標記的磷酸鹽)。

 

在這其中,透析胎牛血清的使用*,即給細胞創(chuàng )造一個(gè)無(wú)外源氨基酸干擾的環(huán)境。

 

二、細胞水平的藥物篩選

例如:有人要從化合物庫中篩選S1P4受體的拮抗劑,以抑制流感病毒帶來(lái)的免疫激活導致的肺損傷。他采用報告基因進(jìn)行監測。為了避免細胞培養環(huán)境中存在的小分子的干擾,他也需要用10%的透析胎牛血清加McCoy's 5A培養基來(lái)培養細胞。

 

類(lèi)似在藥物研發(fā)過(guò)程中,采用特定啟動(dòng)子操縱的熒光素酶報告基因,基于細胞平臺的高通量藥物篩選,也都需要無(wú)外源小分子的培養體系,因而也要用透析胎牛血清。

 

三、細胞克隆的篩選

包括雜交瘤細胞和CHO細胞等,由于在進(jìn)行細胞篩選時(shí),需要無(wú)外源小分子如次黃嘌呤和胸腺嘧啶等的干擾,因此也需要用到透析胎牛血清。

目前市面上有一款低調的透析胎牛血清進(jìn)口品牌Ausbian。它在近些年備受實(shí)驗人員青睞。下面給您介紹一下:

 

中文名:Ausbian®透析胎牛血清

英文:Fetal Bovine Serum Sterile Filtered, Dialyzed

品牌:Ausbian®

產(chǎn)地:澳洲

貨號:VS100TZ,VS500TZ

批號:見(jiàn)瓶身

規格:100ml/瓶,500ml/瓶

Ausbian®透析胎牛血清為澳洲進(jìn)口,是在當地政府獸醫部門(mén)的監督下從注冊的出口屠場(chǎng)采集,GMP品質(zhì)生產(chǎn),嚴格質(zhì)控,符合動(dòng)物協(xié)會(huì )要求。

 

產(chǎn)品描述

1.在A(yíng)usbian®特級胎牛血清基礎上,透析過(guò)濾去除10KDa以下小分子,避免外源小分子對細胞的干擾。

2.精選內毒素更低批次,細胞更健康。

3. 每個(gè)批次提供完整的檢測報告。

4.全程冷鏈運輸,不出現凍融現象,保證質(zhì)量不受影響。

5.100毫升,500毫升多種包裝選擇,適合不同實(shí)驗用量需求。

6.國內現貨儲備,避免貨運風(fēng)險。

 

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