血清就是去除了血細胞和纖維蛋白(用于凝血)的成分之后,剩下的血液中的液體。在細胞體外培養中常需要添加血清。血清是細胞所需的營(yíng)養物質(zhì)的天然來(lái)源,具有許多人工合成的培養基所不具備的營(yíng)養因子。它的應用已經(jīng)有了100多年的歷史。那么血清里面含有什么成分呢?
例如《生物制品學(xué)雜志》 1981年第1期第22頁(yè)上就發(fā)表過(guò)1篇《血清的性質(zhì):血清成分的分析》文章,作者是Macleod AJ等。這是一篇翻譯。原始出處是AJ Macleod,O Drummond. Serum quality: an analysis of its components. Developments in Biological Standardization.1980,46:17。
該文章開(kāi)始提到的是蘇格蘭國立輸血站蛋白分離中心用序貫低溫酒精沉淀法處理人血漿,得到了很多成分(注: 血漿是去除了血細胞的血液液體,和血清區別是含有纖維蛋白原),包括凝血因子、纖維蛋白原、免疫球蛋白、白蛋白、a球蛋白和b球蛋白,很多有重要的治療作用。該中心曾在1年中處理了5萬(wàn)升血漿,得到了750kg的血漿蛋白。血漿蛋白中的許多蛋白質(zhì)對細胞生長(cháng)很重要,如銅藍蛋白、轉鐵蛋白和生長(cháng)調節素(somatomedin),還有一些蛋白酶抑制劑,如a-抗胰蛋白酶、抗凝血酶III和a2-巨球蛋白。
該文還指出,胎牛血清蛋白含量一般低于新生?;虺膳Q?。用醋酸纖維素電泳作蛋白成分分析,胎牛血清的白蛋白含量比其他血清高,而球蛋白的含量比其他血清低得多。
注:生長(cháng)調節素(somatomedin)是過(guò)去使用的名字,是一類(lèi)促進(jìn)細胞生長(cháng)分裂的物質(zhì)?,F已發(fā)現,胰島素樣生長(cháng)因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)是生長(cháng)調節素A,玻連蛋白是生長(cháng)調節素B,胰島素樣生長(cháng)因子1(IGF-I)稱(chēng)為生長(cháng)調節素C。
a1-抗胰蛋白酶:主要由肝臟合成,主要作用是保護機體正常細胞和器官不受蛋白酶的損傷,抑制感染和炎癥,維持機體內環(huán)境的平衡。
a2-巨球蛋白:是血漿中分子量大的蛋白質(zhì)。分子量約為65.2萬(wàn)-80萬(wàn),含糖量約8%,由4個(gè)亞單位組成。它與淋巴網(wǎng)狀系統細胞的發(fā)育和功能有密切聯(lián)系。
球蛋白主要與機體免疫功能有關(guān)。
懷孕5-8個(gè)月的母牛被屠宰,發(fā)育未*的牛胚胎心臟穿刺采血獲得。此時(shí)胎牛血中含有特殊的生長(cháng)發(fā)育因子,一旦胚胎發(fā)育*這些因子自動(dòng)消失。
血清中沉淀物的出現有許多種原因,但pu遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會(huì )存在于血清中,亦是造成沉淀物的原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。
若欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內,以400轉/分離心1-2分鐘,上清液即可接著(zhù)加入培養基內一起過(guò)濾。hao不使用過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會(huì )阻塞過(guò)濾膜。在解凍血清時(shí),建議隨時(shí)將血清搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。