與傳統的細胞培養不同,三維(3D)細胞培養,可以更好地重現細胞在體內的狀態(tài)。該方法正逐漸成為細胞培養領(lǐng)域的一大熱門(mén)。
3D培養種類(lèi)眾多,從原理上可以大致分為以下三類(lèi):
一、3D水凝膠培養
交聯(lián)的多聚鏈,或復雜的天然或合成蛋白分子組成的網(wǎng)絡(luò )構成的水凝膠,具有與天然組織相似的生物物理學(xué)特性,因此,可以作為3D細胞培養的基質(zhì)。該材料可以單獨作為基質(zhì)使用,也可以與其他材料聯(lián)合使用。常見(jiàn)的3D水凝膠培養材料有有ECM凝膠、胞外基質(zhì)等。
該方法優(yōu)勢在于以下幾點(diǎn):
1.應用歷程久,支持文獻較多;
2.提供天然生物配體;
3.通常含有生長(cháng)因子和細胞因子。
二、細胞聚集
細胞聚集是指幾個(gè)細胞聚集在一起形成菌團的現象。懸滴培養板與低粘附平面等材料都能使細胞有很好的聚集效果。
該方法的優(yōu)勢在于以下幾點(diǎn):
1.有各種各樣的相關(guān)器材可供挑選
2.細胞成球的大小相對更好控制
三、培養支架
培養支架是一種提供物理支撐的培養手段,細胞可以進(jìn)入支架間隙生長(cháng)并行使功能。培養支架大致可分為兩大類(lèi):
天然支架(如膠原、明膠、纖維蛋白、幾丁聚糖等),生物兼容性,但穩定性較差。
合成支架(如聚苯乙烯、聚己內酯、聚氨酯等),具有一致性、穩定性比較好,生物兼容性較差。
該方式的優(yōu)勢在于以下幾點(diǎn):
1.一致性或生物兼容性都能夠照顧到;
2.與現有的生物培養器皿以及下游分析方法都有比較好的兼容。
無(wú)論是普通的細胞培養還是3D培養,都需要合適的細胞培養體系,來(lái)給細胞提供營(yíng)養與生長(cháng)環(huán)境。胎牛血清作為一種重要的添加成分,其品質(zhì)的優(yōu)劣,在一定程度上決定了細胞實(shí)驗結果是否理想。
Ausbian進(jìn)口特級胎牛血清,采自5-8個(gè)月胎齡牛胚胎中的胎血。此時(shí)胎牛各臟器正處生長(cháng)分化階段,血中含有豐富的生長(cháng)發(fā)育因子,非常適合各種細胞的培養,一旦胚胎發(fā)育好后這些因子自動(dòng)消失。因此8個(gè)月胎齡以上的牛胚胎,已接近足月,不能作為胎牛血清的原料來(lái)使用。
出廠(chǎng)前均應經(jīng)過(guò)嚴格質(zhì)控,并附詳細《檢測報告》,如pH值、滲透壓、內毒素、病毒檢測、促細胞生長(cháng)能力、無(wú)菌等檢查。其中,由于內毒素直接參與細胞凋亡,對細胞培養結果影響較大,且不同批次的血清,內毒素差異又不易控制。
Ausbian血清從出廠(chǎng),到實(shí)驗室,全程低溫冷鏈保護,盡可能避免血清反復凍融。