細說(shuō)《歐洲藥典》中『培養法』支原體檢測

近些年來(lái)，生物醫藥行業(yè)發(fā)展迅速，細胞治療、抗體藥物治療成為研究熱門(mén)。隨之而來(lái)生物制品安全控制，成為相關(guān)從業(yè)者關(guān)注的焦點(diǎn)。

支原體因其隱蔽性高、分布廣泛的特點(diǎn)，一直以來(lái)，在檢測方面存在著(zhù)困難。但對于涉及細胞培養的生物制品等工藝過(guò)程，支原體檢測勢在必行。各國藥典中，都對相關(guān)生物制品的支原體檢測做出了規定。本期內容，我們就來(lái)詳細講講，《歐洲藥典》中支原體檢測方法——培養法。

《歐洲藥典》中，對于培養法有許多限制與規定，總結為如下幾點(diǎn)：

1、確保在所選擇的培養條件下可能存在于待檢測產(chǎn)品中的少量支原體生長(cháng)

2、液體介質(zhì)必須含有酚紅。

3、所選擇的培養基范圍至少能滿(mǎn)足以下幾種微生物生長(cháng)的營(yíng)養需求，即滿(mǎn)足測試菌株的生長(cháng)條件，對每一批新培養基進(jìn)行營(yíng)養特性測試。

培養條件如下：

液體培養：在35-38°C的密封容器中培養。

固體培養：在35-38°C的微親氧條件下(含5- 10%二氧化碳的氮氣和足夠的濕度以防止瓊脂表面干燥)培養。

《歐洲藥典》中規定，支原體培養法檢測，所用的需要進(jìn)行營(yíng)養特性實(shí)驗（特異性驗證）、抑制物質(zhì)實(shí)驗（耐用性）的驗證，才有說(shuō)服力。

另外，待檢測的樣品也需要進(jìn)行一定處理。

從實(shí)驗原理看，培養法檢測支原體有以下特點(diǎn)：

優(yōu)點(diǎn)：靈敏度高

缺點(diǎn)：只能檢測活的支原體

藥典中提到，經(jīng)過(guò)驗證，NAT法可以替代培養法進(jìn)行支原體檢測。

德國MB的支原體qPCR檢測試劑盒：Venor®Gem qEP，通過(guò)《歐洲藥典》方法學(xué)驗證，涵蓋培養法的同時(shí)，規避其短板。