細胞培養中，需要警惕的關(guān)鍵點(diǎn)

許多解決重大疾病的研究，都是以細胞生物學(xué)為基礎的。而細胞生物學(xué)研究的重要手段之一，就是細胞體外培養技術(shù)?？梢赃@樣說(shuō)，沒(méi)有細胞培養技術(shù)，就沒(méi)有如今的細胞生物學(xué)。

細胞培養指在人工創(chuàng )造的與體內環(huán)境相似的體外條件下，比如適宜的溫度、pH，以及一定的營(yíng)養成分，使細胞生長(cháng)、繁殖并維持主要結構和功能的一種技術(shù)。不同細胞在進(jìn)行體外培養時(shí)，在操作上會(huì )有些許不同，需要根據細胞類(lèi)型與實(shí)驗目的，摸索合適的培養條件。

但原則上講，需要注意以下幾個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)：

一、嚴格的無(wú)菌環(huán)境

實(shí)驗環(huán)境的污染是細胞培養的大忌。細菌、真菌、支原體等微生物的污染，都會(huì )造成細胞出現凋亡、裂解等狀況，進(jìn)而影響實(shí)驗結果。因此，要定期對實(shí)驗環(huán)境進(jìn)行清潔消毒?？梢杂孟疽后w對實(shí)驗室的墻壁、地面以及桌椅板凳進(jìn)行噴灑和擦拭，一定時(shí)長(cháng)的紫外線(xiàn)照射，都有不錯的效果。

選擇污染清除試劑，如德國MB公司的Mycoplasma-off，對實(shí)驗臺面實(shí)驗儀器等進(jìn)行噴灑和擦拭，有效預防各類(lèi)污染。


對于培養箱水槽、恒溫水浴鍋，這類(lèi)衛生死角，可定期更換無(wú)菌水，并在水中添加德國MB公司的Water Shield，也能起到預防作用。



二、選擇優(yōu)質(zhì)的培養試劑

細胞用的培養試劑多選用分析級別的試劑。其中，胎牛血清的選擇很重要。劣質(zhì)的胎牛血清不但有污染細胞的風(fēng)險，而且還會(huì )因為營(yíng)養成分的缺乏，改變細胞狀態(tài)，影響實(shí)驗結果。

優(yōu)質(zhì)的胎牛血清，采自5-8月齡牛胚胎，富含各類(lèi)細胞生長(cháng)繁殖所需的營(yíng)養成分，在出廠(chǎng)前均應通過(guò)質(zhì)量檢測，出具《檢測報告》。

締一生物的Ausbian進(jìn)口胎牛血清，選擇內毒素更低的批次，內毒素≤3EU/ml，降低內毒素對細胞的影響，運輸全程冷鏈，避免反復凍融，每批次附有檢測報告。



三、正確的實(shí)驗操作

在進(jìn)行細胞實(shí)驗時(shí)，要嚴格按照操作流程進(jìn)行實(shí)驗。注意實(shí)驗儀器的規范用法與無(wú)菌操作，避免因實(shí)驗操作而帶來(lái)的額外污染。