在細胞更新過(guò)程中,表觀(guān)遺傳信息需要精確地恢復,以維持DNA復制后的細胞身份和基因組完整性。組蛋白標記H3K27me3對胚胎干細胞兼性異染色質(zhì)的形成和發(fā)育基因的抑制至關(guān)重要。
然而,H3K27me3是如何在DNA復制后精確地恢復的,仍然知之甚少。近日,科研人員使用ChOR-seq(復制后染色質(zhì)占用)來(lái)監測DNA復制過(guò)程中H3K27me3在新生DNA上的動(dòng)態(tài)重建。研究人員發(fā)現H3K27me3的恢復速率與致密染色質(zhì)狀態(tài)高度相關(guān)。
此外,科研人員還發(fā)現連接蛋白H1促進(jìn)H3K27me3在抑制基因上的復制后快速恢復,并且在H1部分耗盡后,H3K27me3在新生DNA上的恢復速率大大降低。
最后,體外生化實(shí)驗表明,H1通過(guò)壓實(shí)染色質(zhì)促進(jìn)PRC2對H3K27me3的增殖。
總之,研究結果表明,h1介導的染色質(zhì)壓實(shí)有助于DNA復制后H3K27me3的繁殖和恢復。
相關(guān)研究:
“Histone H1 facilitates restoration of H3K27me3 during DNA replication by chromatin compaction"
該項研究中,為了構建含有mESCs的8×TetO,研究人員直接將8×tetO陣列與驅動(dòng)EGFP基因表達的人類(lèi)CYP26A1啟動(dòng)子融合。
CRISPR/Cas9的引導序列為:5’-TCTGAACTGGCTGTTTAGTC-3’。為了研究組蛋白h1介導的染色質(zhì)壓縮在促進(jìn)H3K27me3增殖中的作用,研究人員分別在野生型或H1c/d/e-TKO靶向mESCs中過(guò)表達HA-EZH2-TetR和FLAG-EED或HA-EED-TetR和FLAG-EZH2。
所有mESCs在明膠包被的組織培養板上生長(cháng),mLIF濃度為1000 U/ml ,培養基中添加15% FBS (Ausbian,澳洲)、100 mM非必需氨基酸、0.1 mM β-巰基乙醇、2 mM l -谷氨酰胺、核苷和抗生素。
該項研究所用到的血清是Ausbian進(jìn)口特級胎牛血清。
Ausbian?胎牛血清?????優(yōu)勢:
1.精選內毒素更低批次(≤3EU/ml),澳洲血源,是細胞典藏等重大項目十幾年的穩定供應品牌。
2.新批次在試用前,提供試用服務(wù),養細胞更放心。
3.每個(gè)批次產(chǎn)量800-2000升,試用滿(mǎn)意的實(shí)驗室批號優(yōu)先鎖定,保證大多數項目?jì)赡瓴恍钃Q批次,細胞試驗數據穩定。
4.每年按廠(chǎng)家生產(chǎn)順序,會(huì )有多批次平行供應,每個(gè)實(shí)驗室專(zhuān)屬批號管理,保證供貨穩定。
5.為Ausbian血清用戶(hù)免費提供申報支持,具有完整的檢測報告,為各類(lèi)項目的申報提供支持(同時(shí)為血清VIP用戶(hù)在支原體檢測、方法學(xué)驗證等方面,提供更多免費延伸性技術(shù)幫助)。
6.針對特殊科研項目,可提供3-5個(gè)平行批次,讓試驗人有更多選擇空間。
7.為Ausbian進(jìn)口血清提供免費代儲存服務(wù),為儲存空間不足的實(shí)驗室提供可靠的血清倉儲保護,按要求隨時(shí)發(fā)貨。
8.Ausbian血清從出廠(chǎng),到實(shí)驗室,全程低溫冷鏈保護,確保血清無(wú)反復凍融。
9.免費真品保障,每個(gè)血清瓶身加貼Viansaga®易破損防偽標簽,Ausbian品牌真品保護,逢假必究,為實(shí)驗室做好售后保障。
10.免費無(wú)憂(yōu)售后,所有實(shí)驗室簽收的Ausbian澳洲進(jìn)口胎牛血清,從簽收日開(kāi)始計算,一年之內,血清在妥善保管、未開(kāi)封未融化、且不影響二次銷(xiāo)售的情況下,均可享受無(wú)條件退貨或換貨的售后保障。
11.免費專(zhuān)業(yè)幫助,匯集近二十年,千萬(wàn)個(gè)血清用戶(hù)細胞培養經(jīng)驗,為各種細胞培養提供問(wèn)題梳理分析,解決方案參考。
12.Ausbian品牌擁有全系列血清產(chǎn)品線(xiàn):
Ausbian澳洲進(jìn)口特級胎牛血清、細胞治療專(zhuān)用胎牛血清(貨號:WS500T(紅點(diǎn))),透析胎牛血清(貨號:WS500TZ)等多系列產(chǎn)品,服務(wù)更專(zhuān)業(yè)更精準。